目的:1、研究中国家族性肌萎缩侧索硬化患者的SOD1基因突变特征,结合其临床特点,分析基因型与临床表型的关系。2、针对发现的突变构建真核表达质粒,为研究该基因突变导致肌萎缩侧索硬化发病机制奠定基础。方法:1、采用PCR、结合DNA直接测序的技术,对8例临床诊断为家族性肌萎缩侧索硬化(FALS)患者的SOD1基因外显子及其内含子交界区域进行变异检测。2、结合基因检测的结果对各个家系临床特点进行分析。3、通过限制性内切酶技术、T4连接、定点诱变等基因重组的技术构建野生型和两种突变体的真核表达质粒SOD1cDNA/pcDNA3.1/myc-和SOD1cDNA/PEGFP/N2。结果:1、在8例家族性ALS患者中发现3例患者携带两种SOD1突变(Cys111Tyr和Gly147Asp),这两种突变为中国人群中首次报道。2、根据基因型与临床表型相关性分析的结果初步推测Cys111Tyr突变导致的临床表型相对温和,而Gly147Asp突变可导致病情较快进展。3、成功构建了野生型及Cys111Tyr、Gly147Asp的SOD1cDNA/pcDNA3.1/myc和SOD1cDNA/PEGFP/N2真核表达质粒,测序验证目的基因序列正确。结论:1、本次研究在中国家族性肌萎缩侧索硬化患者中进行了SOD1基因突变筛查,首次在中国人群中检测出Cys111Tyr和Gly147Asp两种错义突变,进一步扩大了中国ALS患者SOD1基因的突变谱,对研究中国FALS患者SOD1基因突变特点和分布规律有一定帮助。2、我们还成功构建了SOD1基因的野生型和两种突变体的真核表达质粒,为研究中国ALS患者基因突变特征及探讨其发病机制奠定了基础。