一株微生物絮凝剂的分离筛选鉴定及其絮凝特性的研究

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微生物絮凝剂具有无毒无害无二次污染、处理效率高等优点,因而受到了学者的广泛关注。本文主要研究了一种高效微生物絮凝剂产生菌的筛分、鉴定及其培养过程,为降低微生物絮凝剂的培养成本,优化了利用传统的通用发酵培养基以及廉价易得的啤酒废水培养基对絮凝剂产生菌的培养过程,并对两种培养基产生的微生物絮凝剂的絮凝特性,耐受性和絮凝机理进行了初步分析。采用传统筛选法、DEHP筛选法和吡啶筛选法共三种筛选方法优选微生物絮凝剂产生菌。结果表明,传统筛选法较其他两种方法的筛出率更高,筛出的微生物对高岭土悬浮液的絮凝效果更好。研究中利用传统筛选法从土壤中筛选出一株微生物絮凝剂产生菌,经过形态鉴定、生理生化鉴定和16S rDNA鉴定其属于克雷伯氏菌属。为提高微生物絮凝剂产生菌对高岭土悬浮液的絮凝效果,对菌Klebsiella sp.OS-1的发酵条件进行优化。结果表明,微生物絮凝剂产生菌的最佳通用发酵培养基为:葡萄糖20 g/L,尿素 0.75 g/L,酵母粉 0.75 g/L,KH2PO42 g/L,K2HPO45 g/L,AlCl30.1 g/L,pH自然状态下即可。培养条件为30℃,28小时收获。为降低微生物絮凝剂Klebsiellasp.OS-1的培养成本,用啤酒废水替换通用发酵培养基的碳源和氮源,并对啤酒废水作为培养基时微生物絮凝剂的发酵条件进行了优化。结果表明,絮凝剂产生菌Klebslella sp.OS-1的最佳培养基为:葡萄糖15 g/L,KH2PO4 2 g/L,K2HPO4 5 g/L,NaCl 0.1 g/L,啤酒废水 CODcr 1013 mg/L,TN 7.2 mg/L,pH6.5 左右。培养条件为:培养温度35℃、摇床转速140 rpm、培养时间40 h。对通用发酵培养基和啤酒废水培养基培养产生的絮凝剂的成分和絮凝特性,耐受性及絮凝机理进行了初步的分析。实验结果表明,利用通用发酵培养基培养的微生物絮凝剂的成分包括:多糖78.6%,蛋白质14.3%。利用啤酒废水培养基产生的微生物絮凝剂的成分包括:多糖69.4%,蛋白质24.5%。两种絮凝剂物质的红外光谱分析表明了该种絮凝剂中含有氨基,羧基,羟基和酰胺基团。因此,两种絮凝剂在成分大致相同,都属于糖类絮凝剂,这与红外和蛋白质的测定结果一致。通用发酵培养基培养的微生物絮凝剂的最佳加量为6.667 mg/L,最佳温度为30℃,耐温范围为20-70℃,最适合的酸碱范围为5-8,不需添加Ca2+,Na+等金属阳离子作为其助凝剂。啤酒废水培养的絮凝剂的最佳加量为10 mg/L,最佳温度为30℃,耐温范围为20-70℃,最适合的酸碱范围为2-7,不需添加Ca2+,Na+等金属阳离子作为其助凝剂。综上所述,啤酒废水培养的微生物絮凝剂不仅降低成本,而且比通用发酵培养基培养的微生物的适应性更强。结合Zeta电位测定结果,初步判断两种絮凝剂的絮凝机理最可能为吸附架桥。
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