论文部分内容阅读
伊犁贝母FritillariapallidifloraSchrenk为百合科Liliaceae贝母属Fritillaria植物,主要分布于新疆伊犁河流域。其鳞茎入药,味苦、甘、微凉,归肺、心经,在临床上是用于治疗呼吸系统疾病的良药。伊犁贝母被收录在《中国药典》中的“伊贝母”项下,是新疆维吾尔族传统维药之一,且产量较高,和同类贝母相比较具有较高的生物碱含量。现代药理学表明,伊犁贝母具有镇咳祛痰和抗炎抗菌等生理活性。为进一步了解伊犁贝母的物质基础,本实验对伊犁贝母95%乙醇提取物进行了系统的分离研究,为伊犁贝母药用价值的进一步开发提供了依据。
本研究的主要内容如下:
1、本实验以伊犁贝母为研究对象,利用硅胶柱色谱、LH-20凝胶柱色谱、反相C18柱色谱和制备型高效液相色谱对伊犁贝母进行了分离纯化,通过波谱学技术结合理化性质,共分离并鉴定出33个化合物。分别鉴定为西贝母碱(1)、17β-Cevanin-6-oxo-5α,20β-diolYibeinine(2)、4-((E)-3-hydroxybut-1-enyl)-3,3,4-trimethylcyclohexanol(3)、环(L-亮-L-缬)二肽(4)、贝母辛(5)、环(L-脯-L-丙)二肽(6)、环(D)-脯-(D)-苯丙(7)、环(苯丙-缬)二肽(8)、环(脯氨酸-甘氨酸)(9)、2-(tetrahydro-5-(2-hydroxyphenyl)-2H-pyran-3-yl)phenol(10)、灯盏花苷Ⅱ(11)、1-O-阿魏酰单甘油酯(12)、4-羟基苯甲醛(13)、2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(14)、7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-9,10-anhydride-8-Propenoicacid(15)、1,3-O-diferuloyl-2-methoxypropanediol(16)、反式异阿魏酸(17)、2,3-O-二阿魏酸甘油(18)、1,3-O-二阿魏酸甘油(19)、阿魏酸甲酯(20)、顺式肉桂酸(21)、阿魏酸乙酯(22)、反式肉桂酸甲酯(23)、丁香脂素(24)、松脂醇(25)、油酸甲酯(26)、1,4-联苯基丁烷(27)、双(二乙二醇)邻苯二甲酸酯(28)、6,7-二甲氧基萘-2-羧酸(29)、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(30)、香草乙酮(31)、西贝母碱苷(32)、香草酸(33)。其中化合物2,3,10,15,16为新化合物,化合物2-4,6-31,33为首次从伊犁贝母中分离得到。
2、分离得到的化合物1–33进行了体外MTT法抗肿瘤活性测试,以子宫颈癌细胞(Hela)、人胃癌细胞(HGC-27)、结肠癌细胞(Ht-29)为目标细胞株,结果显示,化合物1,2,5对这三种肿瘤细胞显示出了不同的体外抑制活性,其中化合物2活性最强,对三种癌细胞株均有显著的抑制活性,其IC50值分别为14.9μM,32.2μM和25.6μM;其次是化合物1和5,对Hela细胞具有良好的抑制活性,其IC50值分别为16.9μM和15.3μM。
本实验通过对伊犁贝母的化学成分进行系统的研究,伊犁贝母中含有丰富的化学成分,生物碱类成分为其主要活性成分。体外抗肿瘤活性筛选结果提示了伊犁贝母具有开发抗肿瘤新药的潜力。
本研究的主要内容如下:
1、本实验以伊犁贝母为研究对象,利用硅胶柱色谱、LH-20凝胶柱色谱、反相C18柱色谱和制备型高效液相色谱对伊犁贝母进行了分离纯化,通过波谱学技术结合理化性质,共分离并鉴定出33个化合物。分别鉴定为西贝母碱(1)、17β-Cevanin-6-oxo-5α,20β-diolYibeinine(2)、4-((E)-3-hydroxybut-1-enyl)-3,3,4-trimethylcyclohexanol(3)、环(L-亮-L-缬)二肽(4)、贝母辛(5)、环(L-脯-L-丙)二肽(6)、环(D)-脯-(D)-苯丙(7)、环(苯丙-缬)二肽(8)、环(脯氨酸-甘氨酸)(9)、2-(tetrahydro-5-(2-hydroxyphenyl)-2H-pyran-3-yl)phenol(10)、灯盏花苷Ⅱ(11)、1-O-阿魏酰单甘油酯(12)、4-羟基苯甲醛(13)、2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(14)、7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-9,10-anhydride-8-Propenoicacid(15)、1,3-O-diferuloyl-2-methoxypropanediol(16)、反式异阿魏酸(17)、2,3-O-二阿魏酸甘油(18)、1,3-O-二阿魏酸甘油(19)、阿魏酸甲酯(20)、顺式肉桂酸(21)、阿魏酸乙酯(22)、反式肉桂酸甲酯(23)、丁香脂素(24)、松脂醇(25)、油酸甲酯(26)、1,4-联苯基丁烷(27)、双(二乙二醇)邻苯二甲酸酯(28)、6,7-二甲氧基萘-2-羧酸(29)、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(30)、香草乙酮(31)、西贝母碱苷(32)、香草酸(33)。其中化合物2,3,10,15,16为新化合物,化合物2-4,6-31,33为首次从伊犁贝母中分离得到。
2、分离得到的化合物1–33进行了体外MTT法抗肿瘤活性测试,以子宫颈癌细胞(Hela)、人胃癌细胞(HGC-27)、结肠癌细胞(Ht-29)为目标细胞株,结果显示,化合物1,2,5对这三种肿瘤细胞显示出了不同的体外抑制活性,其中化合物2活性最强,对三种癌细胞株均有显著的抑制活性,其IC50值分别为14.9μM,32.2μM和25.6μM;其次是化合物1和5,对Hela细胞具有良好的抑制活性,其IC50值分别为16.9μM和15.3μM。
本实验通过对伊犁贝母的化学成分进行系统的研究,伊犁贝母中含有丰富的化学成分,生物碱类成分为其主要活性成分。体外抗肿瘤活性筛选结果提示了伊犁贝母具有开发抗肿瘤新药的潜力。