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目的:探索MARCH1在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用机制。方法:本研究通过免疫组化、蛋白质印迹法分别检测MARCH1在人肝癌组织及癌旁非癌肝组织、人肝癌细胞系(HepG2、Hep3B)及正常肝细胞系(HL-7702、HHL-5)中的表达水平。通过MARCH1 siRNA及MARCH1过表达质粒,分别对HepG2、Hep3B细胞系MARCH1进行沉默及过表达,进行肝癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭生物学功能检测。通过吡柔比星(THP)、黑麦酮酸F(SAF)分别处理肝癌细胞系HepG2、Hep3B,进行肝癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭生物学功能检测。通过Western blot检测分别经MARCH1 siRNA、MARCH1过表达质粒及THP、SAF 处理的肝癌细胞系 HepG2、Hep3B 中 MARCH1、PI3K、AKT、p-AKT、β-catenin、Mcl-1、Bcl-2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-7 相关信号通路分子的蛋白表达水平。此外,构建裸鼠肝癌移植瘤模型;分别采用MARCH1 siRNA局部瘤内多点注射治疗、SAF灌胃治疗的方法,观察肝癌移植瘤的生长情况;进行7.0T小动物MR-DWI功能成像,检测移植瘤的表观扩散系数(ADC值);Western blot检测瘤组织中MARCH1及PI3K/AKT/β-catenin信号通路中各种相关分子Mcl-1、Bcl-2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-7 的蛋白表达水平。结果:本研究结果发现MARCH1在人肝癌组织和人肝癌细胞系(HepG2、Hep3B)中的表达水平较癌旁非癌肝组织和正常人肝细胞系(HL-7702、HHL-5)明显高表达。MARCH1 siRNA、THP和SAF可以下调肝癌细胞MARCH1的表达水平,并抑制了肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡。相反,MARCH1过表达质粒可上调肝癌细胞MARCH1的表达水平,并促进了肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。Western blot实验结果显示,肝癌细胞MARCH1的下调可以抑制PI3K、p-AKT、β-catenin、Mcl-1、Bcl-2 蛋白表达水平,促进 cleaved caspase-3、cleaved caspase-7 蛋白表达水平;MARCH1 的上调可以促进 PI3K、p-AKT、β-catenin、Mcl-1、Bcl-2蛋白表达水平。此外,体内实验结果显示,裸鼠肝癌移植瘤模型经MARCH1 siRNA局部瘤内多点注射治疗或SAF灌胃治疗后,肿瘤的体积及瘤重均减小、ADC值均升高,提示MARCH1 siRNA、SAF的治疗均抑制了肿瘤的进展。Western blot实验结果显示,MARCH1 siRNA、SAF治疗组的移植瘤MARCH1、PI3K、p-AKT、β-catenin、Mcl-1、Bcl-2 的蛋白表达水平下调,cleaved caspase-3、cleaved caspase-7蛋白表达水平上调,提示MARCH1 siRNA、SAF可通过下调MARCH1的表达水平,进而抑制PI3K/AKT/β-catenin信号通路抑制肝细胞癌的发生发展。结论:MARCH1在肝细胞癌中存在异常高表达,MARCH1是通过调节PI3K/AKT/β-catenin信号通路促进肝细胞癌的发生发展。提示,MARCH1可能是肝癌治疗的一个新的靶分子;SAF可通过降低肝细胞癌MARCH1的表达水平达到治疗肝癌的作用,SAF可能是未来一种有前途的治疗肝癌的MARCH1分子靶向药。