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本文主要从以下几方面进行论述： 第一部分 惊恐样行为小鼠中枢神经系统酸敏感离子通道1a表达变化 目的： 探索惊恐样行为模型小鼠中枢神经系统酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion channel1a，ASIC1a)的表达变化。 方法： 将20只雄性的C57BL/6小鼠按照体重随机地分为两组：惊恐样模型组（RET组）和正常对照组（Ctr组），每组10只小鼠。采用大鼠暴露刺激实验，建立惊恐样行为小鼠模型。记录在大鼠暴露10min内，小鼠的防御行为和逃避行为；采用高架十字迷宫（elevatedplus maze，EPM）评估小鼠的焦虑水平，Western blot检测小鼠前额皮层、海马、中脑导水管周围灰质（periaqueductal gray，PAG）ASIC1a的表达水平。 结果： RET组小鼠冻结行为较Ctr组显著增加（P＜0.01)，风险评估行为较Ctr组显著增加（P＜0.01)，接触铁丝网的时间较Ctr组显著降低（P＜0.01)，在保护区停留的时间较Ctr组显著增加（P＜0.01)；RET组小鼠在开放臂的时间百分比较Ctr组显著降低（P<0.05)，在闭合臂的时间百分比较Ctr组显著增加（P＜0.05)。与Ctr组相比，RET组小鼠前额皮层和海马区ASIC1a表达显著上升。而PAG脑区ASIC1a表达显著降低（P＜0.01)。 结论： 大鼠刺激可引起小鼠产生惊恐样行为，同时会引起小鼠前额皮层和海马区ASIC1a表达水平升高，而PAG脑区ASIC1a表达水平降低。 第二部分 背侧中脑导水管周围灰质区一氧化氮和酸敏感离子通道1a参与调节小鼠惊恐样行为及其作用机制的探索 目的： 探索背侧中脑导水管周围灰质区一氧化氮和酸敏感离子通道1a参与调节小鼠惊恐样行为及其作用机制。 方法： 大鼠暴露刺激前，使用脑立体定位技术将一氧化氮供体S-亚硝基-N-乙酰青霉胺（SNAP）（10nmol，20nmol），非选择性NOS抑制剂硝基-L-精氨酸-甲基-酯（L-NAME）（100nmol，300nmol），和选择性ASIC1a阻断剂狼蛛毒素（PcTx-1）（20ng，50ng）分别注入不同小鼠的背侧中脑导水管周围灰质脑区（dorsal periaqueductal greyd，dPAG）。给药后利用SD大鼠暴露刺激C57BL/6小鼠，观察在不同药物，不同浓度作用下小鼠惊恐样行为的表现程度。使用Western blot方法检测在改变dPAG脑区NO浓度时，该脑区ASIC1a、磷酸化的钙调蛋白激酶IIα（phosphorylation of calmodulin-dependent protein kinaseⅡα，p-CaMKⅡα）及钙调蛋白（calmodulin，CaM）的表达变化；抑制dPAG脑区ASIC1a时，该脑区p-CaMKⅡα和CaM表达的变化。 结果： 1.与对照组相比，10nmol和20nmolSNAP组，小鼠表现出冻结时间显著增加（P＜0.001，P＜0.01），SAP时间亦显著性增加（P＜0.05，P＜0.01）；与对照组相比，10nmol SNAP组的小鼠在高架十字迷宫实验中，表现出在开放臂的时间显著缩短（P<0.001)，在闭合臂的时间显著增加（P＜0.01），在旷场实验中表现出在旷场周围区时间显著增加（P＜0.01）。与对照组相比，10nmol SNAP组小鼠dPAG脑区p-CaMKIIα表达水平显著增加（P＜0.01），20nmol SNAP小鼠dPAG脑区，ASIC1a，p-CaMKⅡα和CaM表达水平均显著增加（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.05）。 2.与对照组相比，100nmol和300nmol L-NAME组，小鼠表现出冻结行为的时间均显著减少（P<0.001，P<0.001），300nmol L-NAME组小鼠表现出SAP行为的时间显著减少（P＜0.01）。与对照组相比，300nmol L-NAME组小鼠在高架十字迷宫实验中，表现出在开放臂的时间显著增加（P＜0.05)，在闭合臂的时间显著减少（P＜0.05）。与对照组相比，100nmol L-NAME组小鼠dPAG脑区p-CaMKⅡα和CaM表达水平均显著降低（P＜0.01，P＜0.05）。300nmol L-NAME组小鼠dPAG脑区ASIC1a，p-CaMKⅡα和CaM表达水平均显著降低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01）。 3.与对照组相比，50ng PcTx-1组小鼠表现出冻结行为的时间显著降低（P＜0.05）；20ng、50ng PcTx-1小鼠接触铁丝网的时间均显著性上升（P＜0.05，P＜0.05）；50ng PcTx-1组小鼠待在保护区的时间显著减少（P＜0.01）。与对照组相比，50ng PcTx-1组小鼠在高架十字迷宫实验中，表现出在开放臂的时间显著增加（P＜0.01)，在闭合臂的时间显著减少（P＜0.01），在旷场实验中表现出在旷场周围区时间显著减少（P＜0.01）。与对照组相比，20ng和50ngPcTx-1组小鼠dPAG脑区p-CaMKⅡα表达水平均显著降低（P＜0.05，P＜0.05）。 结论： 研究结果显示，广泛抑制dPAG脑区一氧化氮合成酶抑制NO的合成，减弱了小鼠的惊恐样行为，而在dPAG注射SNAP进而提高脑区内NO的浓度，增强了小鼠的惊恐样行为，在dPAG注射PcTx-1阻断ASIC1a，减弱了小鼠的惊恐样行为。 dPAG区的NO和ASIC1a参与调节小鼠惊恐样行为的产生。NO调节惊恐样行为的过程中，Ca2+流入细胞数量增加，ASIC1a参与了NO调节惊恐样行为以及Ca2+流入细胞的过程。