STAT5、WWOX和c-myc在非小细胞肺癌中的相关性研究

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目的:检测信号转导与转录激活因子5 (Signal transducer and activator of transcription 5, STAT5)、WW结构域氧化还原酶基因(WWdomain-containing oxidoreductase,WWOX)和c-myc蛋白在非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer, NSCLC)组织和正常肺组织中的表达,初步探讨它们在NSCLC的发生、侵袭和转移中的作用。方法:利用免疫组织化学SP法检测40例NSCLC组织中和20例正常组织中STAT5蛋白、WWOX蛋白、c-myc蛋白的表达水平。NSCLC组织均为手术切除获得,术前未作任何放疗或化疗。其中,男性29例,女性11例;年龄为35—78岁,<60岁者22例,≥60岁者18例;鳞癌26例,腺癌14例;肿瘤直径≤3cm者14例,>3cm者26例;有淋巴结转移者18例,无淋巴结转移者22例;Ⅰ-Ⅱ期者24例,Ⅲ-Ⅳ期者16例;高一中分化者30例,低分化者10例。标本组织经福尔马林固定,石蜡包埋,4μm厚连续切片,切片常规脱蜡水化后,蒸馏水冲洗,磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline, PBS)浸泡,高温抗原修复,3%H2O2阻断内源性过氧化物酶活性,并用正常山羊血清封闭交叉反应。滴加一抗(STAT5兔抗人多克隆抗体,鼠抗人WWOX单克隆抗体,鼠抗人c-myc单克隆抗体)孵育,PBS冲洗后滴加生物素标记二抗孵育,PBS冲洗后滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液(S-A/HRP)孵育,PBS冲洗,DAB显色,苏木素复染,透明,封片观察。以胞质或胞核内出现棕黄色颗粒、网织状或棕褐色团块为阳性细胞。其中,STAT5蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞质,少数位于细胞核;’WWOX蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞质;c-myc蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞质。结果:(1)STAT5蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),在肿瘤中的表达高于正常肺组织;WWOX蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),在NSCLC组织中的表达低于正常肺组织;c-myc蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),在NSCLC中的表达高于正常肺组织;(2)STAT5蛋白在NSCLC组织中的表达与肿瘤组织学类型有关,在腺癌中的表达高于在鳞癌中的表达(P<0.01),但与患者的年龄、性别,肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关(P>0.05);WWOX蛋白在NSCLC组织中的表达与淋巴结转移有关,有淋巴结转移的表达低于无淋巴结结转移(P<0.01),但与患者的年龄、性别,肿瘤大小、组织分化程度及TNM分期无关(P>0.05);同样,在NSCLC组织中,c-myc蛋白的表达与肿瘤组织学类型有关,在腺癌中的表达高于在鳞癌中的表达(P<0.01),但与患者的年龄、性别,肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关(P>0.05);(3)STAT5蛋白和WWOX蛋白在NSCLC组织中的表达呈负相关(r=-0.379,P=0.016,P<0.05)。(4)STAT5和c-myc蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性(r=-0.095, P=0.559, P>0.05); (5) WWOX蛋白和c-myc蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性(r=0.115,P=0.479,P>0.05)。结论:(1)STAT5蛋白和c-myc蛋白在NSCLC中的表达增高,显著高于正常肺组织,同时,在NSCLC中WWOX蛋白的表达明显低于正常肺组织,说明过度表达的STAT5蛋白和c-myc蛋白以及表达明显缺失的WWOX蛋白可能均参与了非小细胞肺癌的形成过程。(2)STAT5蛋白和c-myc蛋白在NSCLC中的表达与肿瘤的组织学类型有关,但与患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移和TNM分期无关,提示它们可能只在肿瘤发生过程中发挥作用,而与肿瘤进展、侵袭和转移无关;而WWOX蛋白在NSCLC中的表达与淋巴结转移有关,但与患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型和组织分化程度无关,提示可能与肿瘤的转移有关(3)STAT5蛋白与WWOX蛋白在NSCLC中的表达呈负相关,提示WWOX可能通过抑制STAT5信号转导系统,从而促进细胞凋亡,起到抑癌作用。(4)在NSCLC中,STAT5蛋白与c-myc蛋白的表达之间无相关性,说明c-myc可能并没有通过STAT5信号途径或者是通过其它的方式来诱导肿瘤的发生。(5)在NSCLC中,WWOX蛋白与c-myc蛋白的表达之间无相关性,说明它们在促进细胞转化,导致肿瘤的发生过程可能是各自独立发挥作用的,无协同作用。
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