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研究背景：前列腺癌仍然是威胁人类健康的重要疾病，特别是雄激素非依赖性前列腺癌目前仍然没有特别有效的治疗方法。解决这一问题的关键之一是阐明前列腺癌由雄激素依赖性向雄激素非依赖性转变的发生机制，由此建立新的前列腺癌治疗策略。垂体肿瘤转化基因1通过诱发细胞转化、增殖和血管形成促进肿瘤发生发展，在多种类型的肿瘤和肿瘤细胞株中高表达，并与预后、转移相关，应用siRNA等技术下调PTTG1表达能够抑制多种肿瘤生长。PTTG1是雄激素应答基因，但是其在雄激素非依赖性前列腺癌中的作用尚未得到证实。因此在本研究中通过长期去雄培养建立雄激素非依赖性LNCaP亚系，观察PTTG1在去雄激素培养过程中的表达改变，用siRNA减低PTTG1表达对LNCaP-AI细胞生长、迁移及对雄激素拮抗剂反应的影响，试图了解PTTG1在雄激素非依赖性前列腺癌发生过程中的作用。研究目的：本研究目的是探讨PTTG1基因在前列腺癌由激素依赖转化为激素非依赖过程中的作用，以及雄激素剥夺治疗后胰岛素样生长因子-1等对PTTG1表达的调节作用，观察减低PTTG1表达后雄激素非依赖性前列腺癌细胞对雄激素拮抗剂的敏感性，探讨激素非依赖前列腺癌的发生机制，为晚期前列腺癌基因治疗的提供新靶标，为内分泌治疗提供可靠的预后指标。方法：1.通过长期去雄培养方法培养雄激素依赖性前列腺细胞株LNCaP，建立雄激素非依赖性亚系LNCaP-AI细胞模型，用Western blot、PCR、Transwell、化学发光法等方法检测雄激素受体、细胞增殖、侵袭力以及PSA的分泌等，验证了LNCaP-AI细胞模型。2.用Western blot、RT-PCR等方法检测在去雄培养过程中PTTG1的表达改变，以及胰岛素和IGF-1对LNCaP-AI细胞中PTTG1表达的影响。3.最后我们用siRNA消减PTTG1的表达，用Western blot、RT-PCR、Transwell等方法观察消减PTTG1表达后LNCaP-AI细胞模型的增殖、侵袭力以及对雄激素拮抗剂的反应等。结果：1.通过长期去雄培养方法培养雄激素依赖性前列腺细胞株LNCaP，成功建立雄激素非依赖性亚系LNCaP-AI细胞模型。该模型在去雄培养基中稳定生长、侵袭力增强、PSA分泌下降、AR表达增高。2.在去雄培养后LNCaP中PTTG1的表达水平随时间延长而不断升高，在LNCaP-AI细胞亚系则处于相对稳定水平，并且与前列腺癌转移、侵袭相关的因子也相应升高；胰岛素和IGF-1对LNCaP-AI中PTTG1的表达有抑制作用。3. siRNA有效抑制了PTTG1在LNCaP-AI细胞模型中的表达，细胞生长受抑、凋亡增加、侵袭力减弱、与MAPK途径和PI3K途径有关蛋白以及基质金属蛋白酶、血管生成因子表达下调。siRNA转染减低PTTG1表达+氟他胺显著抑制了LNCaP-AI的生长，提高了细胞死亡率和凋亡率。结论：PTTG1参与雄激素非依赖性前列腺癌发生过程，PTTG1对前列腺癌内分泌治疗的敏感性具有预后价值，增强雄激素非依赖性前列腺癌对雄激素拮抗剂药物的反应，可能是基因治疗的靶标之一。