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目的:明确在白消安联合氟达拉滨化疗方案预处理小鼠Haplo-HSCT GVHD模型上,研究甲强龙、G-CSF动员的供者MDSCs预防移植物抗宿主病及其机制。方法:通过白消安联合氟达拉滨方案预处理化疗、以C57BL/6小鼠♂和DBA/2小鼠♀杂交的子一代小鼠(B6D2F1)为受者,回输C57BL/6小鼠的骨髓和脾细胞建立半相合骨髓移植后GVHD模型。于移植当天,回输甲强龙或rh G-CSF动员的供者MDSCs。实验分四组,C57BL/6供者小鼠的10*106骨髓细胞(BM)和75*106脾细胞(SPL)加甲强龙动员的6*106 MDSCs或G-CSF动员的MDSCs或静息MDSCs 6*106个,或均不加。应用流式细胞技术验证供者细胞的植入,并通过观察记录F1受者小鼠移植后体重的变化、a GVHD的临床表现、生存情况以及靶器官的组织病理。应用q PCR技术检测动员前后MDSCs micro RNA155、micro RNA21,ARG1、i NOS等表达情况,应用MLR方法检测MDSCs抑制功能。结果:①GVHD模型的建立:以白消安20ug/g和氟达拉滨10ug/g联合方案预处理化疗B6D2F1小鼠,回输C57BL/6供者小鼠的10*106骨髓细胞加75*106脾细胞,观察脾细胞组出现体重减轻、腹泻、弓背、脱毛等GVHD临床症状,流式验证供者CD4、CD8+T淋巴细胞、B淋巴细胞及树突状细胞的成功植入,成功建立C57BL/6→B6D2F1haplo-HSCT模型。②甲强龙、G-CSF动员剂量的确定:甲强龙(4mg/只qd*3)动员骨髓MDSCs达到80%,G-CSF(250 ug/kg qd*5)动员骨髓MDSCs比例达到90%,能够满足实验要求。③甲强龙、G-CSF动员的供者MDSCs预防GVHD的疗效:甲强龙组与G-CSF组较对照组相比,受鼠体重下降较缓慢,GVHD症状较轻,移植后d10天取受者的皮肤、大肠、小肠、肺等靶器官病理组织行HE染色,病理显示:甲强龙组与G-CSF组靶器官淋巴细胞浸润较少,炎症轻。④MDSCs预防GVHD的机制:甲强龙、G-CSF动员的MDSCs上调mi R-155、mi R-21水平,其中mi R-21的水平高于mi R-155水平。G-CSF动员的MDSCs的i NOS表达较对照组及MP组明显升高。结论:1.甲强龙、G-CSF动员的供者MDSCs能够有效预防/减轻GVHD。2.甲强龙、G-CSF动员的供者MDSCs可能通过上调其micro RNA155、micro RNA21、i NOS表达,发挥其抑制功能而达到预防/减轻GVHD的功效。