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目的:以mPEG-b-PAsp(DA)为载体,以具有近红外荧光成像[1]和光热治疗特性[2]的诊疗分子吲哚菁绿(～800 nm)和化疗药物阿霉素为模型药物,制备具有近红外荧光成像,光热治疗和化学治疗多功能的聚合物胶束[3],增强诊断和治疗效果。方法:(1)以mPEG-b-P(Asp)(DA)为载体,采用溶剂蒸发法制备聚合物胶束。采用三乙胺原位脱盐法除去盐酸阿霉素中的盐[4]。通过动态光散射粒径仪测定胶束粒径。利用荧光和紫外-可见分光光度计考察荧光和紫外-可见吸收的特性,并考察在不同pH以及光照非光照条件下聚合物胶束的释放行为[5]。(2)以人源性肺癌细胞株A549细胞为体外肿瘤模型,采用MTT法评价材料的安全性,游离ICG/DOX及其胶束在785 nm[6]激光照射和无激光照射条件下的细胞毒性,荧光分光光度法测定细胞摄取量。同时采用流式细胞术考察细胞内吞途径[7];采用台盼蓝染色[7]观察不同给药组的细胞死亡现象;用DPBF荧光探针法[8],吖啶橙染色[9],DHE染色[10]探讨光热效应[11]对化疗增敏的机制。(3)将人源性肺癌细胞株A549细胞植入裸鼠皮下作为体内肿瘤模型[12],采用小动物活体成像技术考察聚合物胶束在裸鼠体内的组织分布及成像情况[13],并采用高效液相色谱法测定DOX[14]在裸鼠体内的分布情况。(4)采用A549细胞裸鼠皮下肿瘤模型,考察不同给药组及光照和非光照条件下的抗肿瘤效果。结果:(1)以mPEG-b-PAsp(DA)为载体,ICG和DOX为模型药物,制备出了平均粒径为71.4±6.9 nm,多分散指数为0.168的胶束。ICG和DOX的载药量均为20%,ICG和DOX的包封率分别为94.7%±0.8%,DOX为82.3%±0.8%。初步稳定性实验结果显示所制得的聚合物胶束的在25℃下保存粒径较稳定。与游离药物相比,其荧光及紫外-可见吸收的稳定性明显提高。胶束的体外释放行为体现出显著的缓释特性。(2)体外细胞实验显示高浓度ICG/DOX胶束在光照条件下对细胞具有很强的细胞毒性,并且在低浓度下ICG诱导产生的单线态氧能够使酸性细胞器膜破裂,增强DOX的化疗效果。(3)小动物活体成像实验显示ICG/DOX胶束较游离的ICG/DOX在肿瘤部位滞留的时间更长,更有利于成像和治疗。(4)抑瘤实验显示ICG胶束光照组可以消除肿瘤,但一段时间后肿瘤会再生,DOX胶束组可以抑制肿瘤的生长但很难消除肿瘤,而ICG/DOX胶束光照组可以很好的消除肿瘤,并且可以抑制肿瘤的再生,相较而言具有更好的抗肿瘤效果。结论:本研究以mPEG-b-PAsp(DA)为载体制备出了平均粒径约为71.4 nm的载吲哚菁绿/阿霉素聚合物胶束,该胶束具有较高的载药量和包封率,并显著提高了肿瘤细胞对ICG和DOX的摄取,近红外荧光成像结果显示吲哚菁绿/阿霉素胶束在肿瘤部位有较好的靶向性,抗肿瘤活性显著增强(高浓度时光热治疗和化疗协同作用杀伤肿瘤细胞,低浓度是ICG诱导的单线态氧破坏内吞酸性细胞器膜,增强化疗药物DOX的抑瘤作用,从而实现肿瘤细胞彻底清除,避免肿瘤的再生)。