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目的:前列腺癌骨转移严重威胁男性健康和生命,总体疗效不佳,迫切需要探索寻找新的有效药物。蟾酥提取物蟾毒灵具有广谱的抗肿瘤作用,但目前未见蟾毒灵干预前列腺癌侵袭转移的研究报道。本课题拟研究蟾毒灵抗前列腺癌骨转移的作用及其机制。方法:首先,通过细胞迁移及侵袭实验观察蟾毒灵对去势抵抗性前列腺癌细胞DU145和PC3迁移侵袭能力的影响,对比用药前后lnc RNA(long non-coding RNA)表达谱发现HOTAIR(HOX transcript antisense RNA)表达显著下调,通过生物信息学方法预测HOTAIR的作用靶点并进行实验验证。其次,通过实验和临床研究探讨HOTAIR在前列腺癌骨转移中的作用:实验研究以前列腺癌细胞与成骨样细胞MG-63共培养模拟骨转移微环境,观察过表达HOTAIR的前列腺癌细胞对成骨样细胞增殖活性及其分泌细胞因子的影响;临床研究应用原位杂交检测40例患者前列腺癌原发灶及骨转移灶石蜡切片中HOTAIR表达水平,并检测80例前列腺癌患者血清中HOTAIR及骨代谢指标水平。比较前列腺癌原发灶及骨转移灶中HOTAIR表达水平的差异,分析组织HOTAIR表达水平与患者临床病理特征的相关性,分析血清HOTAIR水平与骨代谢指标的相关性,并分析血清HOTAIR对诊断前列腺癌骨转移的灵敏度及特异度。结果:蟾毒灵显著抑制DU145和PC3细胞迁移和侵袭能力,其机制与抑制HOTAIR/mi R-520b/FGFR1轴有关。过表达HOTAIR的前列腺癌细胞可以增强共培养环境中成骨样细胞增殖活性,并上调成骨样细胞中RANKL(receptor activator of nuclear factorκB ligand)表达、下调其OPG(osteoprotegerin)表达,从而有可能通过调节RNAKL/RANK/OPG轴促进破骨细胞活化和骨转移发生。前列腺癌骨转移灶标本HOTAIR表达水平显著高于原发灶,并与患者血清PSA水平相关;前列腺癌患者血清HOTAIR水平与骨代谢指标呈正相关,对诊断前列腺癌骨转移具有较高的灵敏度和特异度。结论:蟾毒灵通过下调HOTAIR抑制前列腺癌侵袭转移。HOTAIR与前列腺癌骨转移密切相关,分别通过增强前列腺癌细胞迁移侵袭能力以及作用于骨转移微环境促进前列腺癌发生骨转移,血清HOTAIR水平可以作为诊断前列腺癌骨转移的标志物。