短短芽胞杆菌(Brevibacillus brevis)FJAT-0809-GLX是本实验室自土壤中分离的对多种病原菌具有抗菌活性,可以抑制青枯雷尔氏菌、大肠杆菌等细菌的生长,也可以抑制尖胞镰刀菌等真菌的生长。本实验建立了固相萃取-高效液相色谱法测定该菌功能物质羟苯乙酯,并利用响应面优化其发酵条件。首先,建立了固相萃取-高效液相色谱法测定短短芽胞杆菌发酵液中羟苯乙酯含量的体系。样品发酵液经过Oasis HLB固相萃取小柱,经过C18色谱柱进行测定。流动相为甲醇-水(体积比为65：35),流速1.0 mL/min,检测波长为254 nm,测定温度为25℃,进样量10μL。羟苯乙酯的线性范围为1.0-20.0 mg/L, r=0.998,回收率为96.2%-105.3%,平均RSD为0.8%,最低检测为1.0×10-15(S/N=6)。该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、重现性好,可用于发酵液中羟苯乙酯含量的检测。其次,进行了发酵培养基优化。通过单因素筛选确定最佳碳源为DL-苹果酸,氮源为蛋白胨,最佳金属离子为Na+。采用二水平Plackett-Burman设计对影响羟苯乙酯产量的8因素进行显著性筛选,获得培养基成分中3个重要影响因子：豆饼粉、DL-苹果酸、NaCl;运用爬坡路径法对这3种因子进行试验,获得3种重要因子的最适浓度范围；通过响应面分析法得到3个重要因子的交互作用和最佳条件：豆饼粉25.18 g/L、DL-苹果酸29.68g/L、NaCl 13.18 g/L、蛋白胨2 g/L、温度35℃、接种量2%、通气量100/250 mL、转速170r/min。优化结果与实际实验结果吻合较好,较基础发酵培养基(2.311 mg/mL)提高了71.64%。说明响应面设计分析较成功地应用于本培养基优化试验。发酵培养基的优化对菌种的优化非常重要,本研究结果对该菌株的工业发酵和羟苯乙酯的生产具有重要意义。