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目的:探讨SAHA对高原失血性休克大鼠肺组织闭合蛋白表达的影响,及其肺保护作用的可能机制。方法:健康雄性Wistar大鼠84只,体重250～300 g,随机分为7组(n=12):假手术组(Sham组)、休克不复苏组(NR组)、乳酸林格氏液复苏组(LR组)、高渗盐羟乙基淀粉40复苏组(HSH组)、异羟肟酸复苏组(SAHA组)、乳酸林格氏液复合异羟肟酸复苏组(LR+SAHA组)和高渗盐羟乙基淀粉40复合异羟肟酸复苏组(HSH+SAHA组)。在马衔山(甘肃,海拔3780m)地区,根据wigger’s法复制高原重度失血性休克模型,Sham组只置管不失血、不复苏,维持3h后处死取材。NR组仅复制高原重度失血性休克模型,不复苏,休克90min后即刻处死留取标本待检。余组休克维持90min后给予不同复苏治疗:LR组和HSH组分别于20min和5min内恒速输注1.5倍失血量LR和4ml/kg HSH;LR+SAHA组和HSH+SAHA组分别将7.5mg/kg SAHA溶于1.5倍失血量LR和4ml/kg HSH于20min和5min内恒速输注;SAHA组将7.5mg/kg SAHA溶于0.25ml生理盐水于5min内恒速输注;上述五复苏组均在复苏后3h处死大鼠,实验结束抽取动脉血和获取肺组织保存。光镜下观察肺组织损伤程度;透射电镜下观察肺上皮紧密连接、细胞凋亡和细胞器结构。测定肺湿/干比重(W/D);计算肺通透指数(LPI)、氧和指数、呼吸指数;同时测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)活性、TNF-α含量。免疫组织化学技术检测肺组织claudin-3和claudin-4的表达和分布。Western blot检测肺组织claudin-3、claudin-4、P-JNK、P-P38和NF-κB蛋白的变化。结果:与Sham组比较,NR组、LR组、LR+SAHA组、HSH组W/D、肺损伤分数、肺通透指数、呼吸指数、氧和指数、肺组织claudin-3下降(P<0.05),MPO、肺组织 claudin-4 升高(P<0.05),Western blot 结果中 claudin-3 和 claudin-4蛋白表达显著降低,P-JNK、P-P38和NF-κB表达明显升高(P<0.05);HSH+SAHA组W/D、肺损伤分数、肺通透指数、呼吸指数、肺组织claudin-3、claudin-4升高(P<0.05),MPO 下降(P<0.05),Western blot 结果中 claudin-3、claudin-4、P-P38蛋白表达显著降低,P-JNK和NF-κB表达明显升高(P<0.05);NR组、LR 组 MDA 升高(P<0.05);LR+SAHA 组、HSH 组、HSH+SAHA 组 MDA 无统计学差异(P>0.05)。与 NR 组比较,LR 组 W/D、claudin-3、claudin-4 显著升高(P<0.05),肺损伤分数、肺通透指数、呼吸指数、氧和指数无统计学差异(P>0.05),MPO、MDA 和 TNF-α 明显下降(P<0.05),Western blot 结果中claudin-3 表达显著升高(P<0.05),NF-κB、P-JNK、P-P38 表达显著降低(P<0.05)。LR+SAHA 组、SAHA 组、HSH 组、HSH+SAHA 组 W/D、肺损伤分数、肺通透指数、呼吸指数、MPO、MDA和TNF-α明显下降(P<0.05),氧和指数、claudin-3、claudin-4 明显升高(P<0.05),Western blot 结果中 claudin-3 和 claudin-4的表达均不同程度上升(P<0.05),P-JNK、P-P38和NF-κB表达则下降(P<(0.05),HSH+SAHA组变化幅度最大。与SAHA组比较,LR组肺损伤分数、W/D、肺通透指数、claudin-3、claudin-4降低(P<0.05),肺呼吸指数和氧和指数无统计学差异(P>0.05),MPO、MDA 和 TNF-α 升高(P<0.05),Western blot结果中 claudin-3 和 claudin-4 下降(P<0.05),NF-κB、P-JNK、P-P38 表达显著升高(P<0.05);HSH 组 W/D、MPO、MDA 和 TNF-α 下降(P<0.05),claudin-3、claudin-4升高(P<0 05),余参数无统计学差异(P>0.05),Western blot结果中 claudin-3 和 claudin-4 升高(P<0.05),NF-κB、P-JNK、P-P38 表达显著下降(P<0.05);LR+SAHA组和HSH+SAHA组肺损伤分数、W/D、肺通透指数、MPO、MDA 和 TNF-α 降低(P<0.05),肺呼吸指数、氧和指数、claudin-3、claudin-4升高(P<0.05),Western blot 结果中 claudin-3 和 claudin-4 上升程度、P-JNK、P-P38和NF-κB下降程度具有统计学差异(P<0.05)。与LR组比较,HSH组肺损伤分数、W/D、肺通透指数、MPO、MDA和TNF-α降低(P<0.05),claudin-3和claudin-4上升(P<0.05),肺呼吸指数和氧和指数无统计学差异(P>0.05),western blot 结果中 claudin-3 和 claudin-4 上升(P<0.05),P-JNK、P-P38 和 NF-κB下降(P<0.05)。HSH组与LR+SAHA组比较上述指标无统计学差异(P>0.05)。结论:高原失血性休克激活肺内炎性因子MPO、TNF-α表达和氧化因子MDA表达,导致肺组织上皮细胞上claudin-3和claudin-4的流失,肺上皮细胞屏障功能受到破坏,引发ALI;SAHA单独和/或配伍HSH可通过减少肺内claudin蛋白的丢失减轻肺损伤而发挥肺保护作用,且SAHA复合HSH治疗效能最大,其可能与下调TLR4-MAPK/NF-κB表达途径有关。