【摘 要】
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齿小蠹属Ips spp.隶属于鞘翅目(Coleoptera)小蠹科(Scolytidae)齿小蠹亚科(Ⅰpinae),较多分布于北美地区,主要危害松属以及云杉属等植物,全世界种类超过60种,有18种皆属检疫
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齿小蠹属Ips spp.隶属于鞘翅目(Coleoptera)小蠹科(Scolytidae)齿小蠹亚科(Ⅰpinae),较多分布于北美地区,主要危害松属以及云杉属等植物,全世界种类超过60种,有18种皆属检疫性有害生物,有25个位北美本地种。齿小蠹被认为是危害最为严重的攻击性小蠹之一,该属某些种类如果传至我国,可能会引起严重为害。而北美地区中加拿大更是我国主要原木进口区,因此,我们应加倍注意对来自加拿大进口木材的检疫。有害生物的准确鉴定是检疫的前提,加之齿小蠹属昆虫的成虫形态非常相似,可识别特征又有限,个体差异存在并且口岸截获易造成昆虫的肢体损害,影响形态鉴定的准确性。而近几年来,分子鉴定技术飞速发展。所以本文以期通过DNA条形码技术,对来自加拿大云杉上的齿小蠹属昆虫进行研究,从而对口岸中在加拿大云杉原木上截获的齿小蠹进行直接而快速有效的鉴定。主要研究结果如下:1.研究齿小蠹属形态分类,分析齿小蠹属识别鉴定特征,摄取各个种背、腹、侧面高清图辅助鉴定分析。2.提取基因组DNA,筛选出合适的PCR扩增体系后扩增COⅠ基因序列。分析已扩增的序列,自行设计针对加拿大云杉上齿小蠢属的引物,成功扩增出5种齿小蠹,说明该引物具有扩增加拿大云杉上齿小蠹属昆虫基因组DNA的通用性和可行性。3.COⅠ基因序列分析。对所获齿小蠹属COⅠ基因扩增序列进行拼接校正、比对,利用MEGA分析并计算其遗传距离和系统进化关系。最后结果显示:种内以及中间距离符合条形码的使用标准,适用于加拿大云杉原木上齿小蠹属昆虫的鉴定。4.DNA条码初步构建。基于遗传距离和系统发育树,对齿小蠹属的COⅠ基因序列进行了分析和评价,发现符合条形码检验标准,可用于物种鉴定。完成加拿大云杉上齿小蠹属DNA条形码鉴定研究及检测技术的开发。
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