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仿刺参是我国重要的水产养殖对象,当海水温度升高到一定范围时会进入夏眠。夏眠过程延长养殖周期,增加养殖风险,是仿刺参研究领域的热点。FoxO(Forkhead box O)作为转录调节因子,在调节体内活性氧(ROS)的水平及细胞增殖分化、转录调控、应激调控、免疫调节、信号转导途径等方面起重要作用,Nrf1(NF-E2-related factor1)作为转录因子,在遭到氧化应激时被Keap1(kelch-like ECH-associated protein-1)激活,结合抗氧化反应元素ARE,它调节一系列抗氧化基因并参与氧化应激。过氧化物氧还蛋白(Prx)是生物体抗氧化系统的重要组成部分。因此FoxO、Keap1、Nrf1、及Prxs重要防御调控基因对于抗氧化防御系统有重要作用。 本研究将选定的抗氧化防御调控基因与多个物种的氨基酸序列进行比较,进行多重序列比对和同源性分析以确定其序列的可靠性。为了研究夏眠对仿刺参各组织抗氧化功能及FoxO、Keap1、Nrf1、Prxs基因表达的影响,将仿刺参以15士0.5℃暂养7d后,以1℃/d升温直至达到目的温度,之后保持25±0.5℃范围10d,再以1℃/d降温直至15℃。分别于7d、18d、28d、40d等四个时间点分别随机取4头仿刺参的组织样品进行检测,取仿刺参的体壁,肌肉、肠道、呼吸树和体腔液组织样品进行检测,结果表明仿刺参在进入夏眠后,FoxO、Keap1/Nrf1及Prxs基因主要在肠道、呼吸树等组织表达量发生明显变化;对仿刺参夏眠不同时期FoxO、Keap1/Nrf1通路及其下游Prxs等基因的表达水平进行检测,结果显示在仿刺参夏眠阶段,呼吸树以及肌肉组织中FoxO表达水平均显著升高,呼吸树、肠道组织中Keap1与Nrf1表达水平均显著升高,其下游5个基因中PRDX2、PRDX3、PRDX4、PRDX5表达显著升高。上述结果表明,夏眠导致了仿刺参的氧化应激,FoxO、Keap1/Nrf1通路可能在抗氧化应激中发挥着重要的作用。 为了研究仿刺参中FoxO和Nrf1基因启动子的单核苷酸多态性(SNPs)与抗氧化力之间的关系,采用PCR产物直接测序方法检测了30个抗氧化力高和30个抗氧化力低仿刺参个体的FoxO及Nrf1基因启动子的多态性,结果在FoxO中检测到1个SNP位点-310A-C,在Nrf1中发现2个SNP位点-113T-C、-116G-A,其等位基因频率分布符合Hardy Weinberg平衡定律(p>0.05)。统计等位基因频率,用卡方检验检验了SNP位点多态性与抗氧化性状的相关性(χ2)。并初步认为这三个SNP位点与仿刺参的抗氧化力这一性状具有相关性。