魔芋葡甘聚糖的化学改性及用于疫苗载体的初步研究

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魔芋葡甘聚糖(KGM)作为一种天然高分子多糖,具有良好的生物相容性和生物降解性,在缓释控释材料研究中表现出良好的应用前景。本文采用KGM为原料,首先对其进行化学改性,然后采用离子交联法制备出两种新型的纳米载体材料,以卵清蛋白(OVA)为疫苗模型,研究了两种新型纳米材料载体对OVA的包封能力及体外缓释性能,为其将来用于疫苗载体做了初步理论研究。主要研究内容和结果如下:(1)采用KGM为原料,首先用盐酸催化降解,发现降解2h后所得产物溶液粘度最低,且降解后的产物保留了KGM的基本结构;然后分别用一氯乙酸和2,3-环氧丙基三甲基氯化铵对其改性,制备出分子量低、水溶性好的羧甲基魔芋葡甘聚糖(CKGM)和季铵化魔芋葡甘聚糖(QKGM),所得取代度分别为1.08和0.14。(2)采用聚电解质复合法制备出CKGM/QKGM复合纳米微球,以模式抗原卵清蛋白(OVA)为疫苗模型,探究了该复合纳米微球对OVA的包封能力及体外缓释性能。实验结果表明:当CKGM浓度在0.5mg/m L~3.0mg/m L时,QKGM浓度范围为1.0mg/m L~3.0mg/mL时,易获得乳光悬液得到CKGM/QKGM纳米材料载体。CKGM/QKGM纳米材料载体包覆OVA的最佳制备工艺为:CKGM浓度为1.5mg/m L,QKGM浓度为1.5mg/m L,OVA浓度为2.5mg/mL,OVA溶液的pH值为8.15,最大包封率为49.2%。该条件下CKGM/QKGM空白载体和CKGM/QKGM/OVA纳米载体基本上均为球形,粒径分布较宽,平均粒径分别为572.3nm和717.1nm。CKGM/QKGM/OVA纳米材料载体整个体外释放过程包括突释、缓慢释放、平衡释放三个阶段,且制备工艺对体外释放性能有较大影响,通过减小CKGM浓度或者OVA浓度,增大QKGM浓度或者OVA溶液的pH值,均能有效减小OVA的累积释放率;反之,可以增加OVA的累积释放率。(3)采用离子交联法制备出(三聚磷酸盐)TPP/QKGM复合纳米微球,以模式抗原卵清蛋白(OVA)为疫苗模型,通过单因素和正交实验优化制备工艺,并考察了制备条件对其体外释放性能的影响。实验结果如下:QKGM浓度在其形成过程中起着关键性作用,且当QKGM浓度在0.5mg/mL~3.0mg/m L时,TPP浓度在0.5mg/m L~5.0mg/m L时,易制得TPP/QKGM纳米材料载体。TPP/QKGM纳米材料载体包覆OVA的最佳制备工艺为:TPP浓度为0.5mg/mL,QKGM浓度为1.0mg/mL,OVA浓度为2.0mg/mL,OVA溶液的pH值为6.15,最大包封率为67.7%。该条件下TPP/QKGM空白载体和TPP/QKGM/OVA纳米载体基本上均为球形,粒径分布较宽,平均粒径分别为439.5nm和706.5nm。TPP/QKGM/OVA纳米材料载体整个体外释放过程包括突释、缓慢释放、平衡释放三个阶段,且相对于OVA浓度及pH值,TPP浓度和QKGM浓度对体外缓释性能有较大影响。
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