【摘 要】
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目的:探讨口腔鳞癌组织内chemerin的表达调控中性粒细胞浸润、功能促进口腔鳞癌演进的分子机制。方法:免疫组织化学双染色方法探讨中性粒细胞浸润与chemerin表达之间的关系,分析chemerin的表达和中性粒细胞的密度以及二者与口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）患者临床病理特征及预后的关系;通过流式细胞术、Transwell实验、蛋白质印迹法（wes
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目的:探讨口腔鳞癌组织内chemerin的表达调控中性粒细胞浸润、功能促进口腔鳞癌演进的分子机制。方法:免疫组织化学双染色方法探讨中性粒细胞浸润与chemerin表达之间的关系,分析chemerin的表达和中性粒细胞的密度以及二者与口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）患者临床病理特征及预后的关系;通过流式细胞术、Transwell实验、蛋白质印迹法（western blot）、酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）和构建慢病毒载体HBLV-h-sh Chem R23来检测chemerin对中性粒细胞的趋化作用。通过OSCC细胞和d HL-60细胞共培养和MTT实验检测chemerin对共培养体系中d HL-60的瘤细胞杀伤能力的影响。应用Western blot技术检测chemerin通过中性粒细胞对OSCC上皮-间质转化相关蛋白的影响。结果:免疫组化双染色结果显示chemerin表达与口腔鳞癌组织中中性粒细胞浸润的密度密切相关（P=0.023）,chemerin高表达且中性粒细胞高密度与较高临床分期（P<0.001）,淋巴结转移（P<0.001）和肿瘤复发有关（P=0.002）;而与患者的性别、年龄、病理分级、肿瘤大小无关（P>0.05）。Kaplan–Meier生存分析表明,chemerin高表达且中性粒细胞高密度组患者的癌症相关总体生存期和无病生存期均缩短。Transwell结果显示OSCC细胞和重组chemerin均对d HL-60细胞有明显趋化作用;敲除d HL-60细胞上的Chem R23后抑制了chemerin对d HL-60细胞的趋化作用。chemerin同时还上调了d HL-60细胞内其它中性粒细胞趋化因子,如IL-17和CXCL-5的表达。另外,共培养实验显示chemerin削弱了d HL-60细胞对OSCC细胞的杀伤作用（P<0.05）。chemerin可能通过中性粒细胞促进OSCC细胞发生上皮间质转化（EMT）,即N-cadherin和Vimentin的表达增强,而E-cadherin的表达减弱。结论:OSCC中chemerin高表达且中性粒细胞高密度与OSCC患者不良的临床预后有关。chemerin可能通过其受体Chem R23和上调趋化因子IL-17和CXCL-5的表达吸引更多的中性粒细胞到达肿瘤部位。chemerin削弱中性粒细胞的瘤细胞杀伤能力以及通过中性粒细胞促进肿瘤EMT,进而促进肿瘤的演进和异质化。
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