茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌的抑制作用

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目的:研究茅苍术挥发油在体内外对金黄色葡萄球菌的抑制作用,并初步探讨其对金黄色葡萄球菌的抑制机制,为金黄色葡萄球菌相关感染的治疗和新型抗感染药物的研发提供新的思路。  方法:  1.通过微量肉汤稀释法药敏试验,检测茅苍术挥发油最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimumbactericidal concentration, MBC);  2.检测不同浓度茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌凝固酶、纤维蛋白原凝集因子和α-溶血素的影响;  3.利用Real-Time PCR法检测茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌α-溶血素毒力基因Hla及其调控基因AgrA的影响;  4.通过动物实验观察茅苍术挥发油在体内对金黄色葡萄球菌的影响,并通过RT-PCR法检测病变组织中IL-1β mRNA的变化。  结果:  1.茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的MIC的范围都在0.03125%-0.0625%(v/v),除了金葡标准株的MBC在1%(v/v)以外,其余临床菌株的MBC都大于1%(v/v);对于大肠杆菌、枯草杆菌和铜绿假单胞菌没有抑制作用;  2.茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌外排总蛋白量没有影响,能够抑制金黄色葡萄球菌凝固酶、纤维蛋白原凝集因子和α-溶血素的分泌;四株菌株凝固酶和α-溶血素的分泌都受到抑制且呈浓度依赖性,其中一株菌株在1/2MIC、一株菌株在1/4MIC、两株菌株在1/8MIC时能显著减少纤维蛋白原凝集因子的分泌;  3.茅苍术挥发油抑制了AgrA基因和Hla基因的表达;AgrA基因和Hla基因的表达量不呈线性相关;  4.ICR小鼠皮下注入金黄色葡萄球菌菌液2天后形成皮下脓肿模型;病理组织切片显示,茅苍术挥发油预先处理细菌组较阳性对照组炎症反应程度较轻,药物治疗组炎症随加药时间延长有愈合倾向;  5.RT-PCR显示,病变组织周围IL-1β mRNA水平在加药后减低。  结论:  本研究通过体外和体内试验分别证实了茅苍术挥发油对金黄色葡萄球菌的生长有抑制作用,并能影响多种毒力因子的分泌。
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