目的研究NGAL、E-cadherin、MMP-9在结肠癌中的表达及其与复发转移的关系,进一步探讨三者之间的相互关系及其与预后的关系,初步探讨NGAL参与结肠癌侵袭转移的分子机制。方法回顾性分析天津医科大学附属肿瘤医院2000年1月至2004年12月227例结肠癌患者的临床资料,总结其临床病理特征及随访结果,并将227例病例对应的石蜡标本制作成组织芯片,其中复发与转移组83例,无复发转移组144例,用免疫组织化学方法检测结肠癌组织中NGAL、E-cadherin和MMP-9的表达情况,分析其与复发转移及预后的关系。结果1.临床病例资料回顾在227例结肠癌患者中,复发转移组83例,平均生存时间为(32.710±2.360)个月,中位生存时间为25个月；无复发转移组144例,平均生存时间(62.454±2.821)个月,中位生存时间为73个月。复发与转移与淋巴结转移、病理分级、临床分期、接受化疗密切相关。存在淋巴结转移的患者其更易发生复发与转移(X2=116.3,P=0.000)；病理分级越高,越容易发生复发与转移(X2=18.611,P=0.000)；临床分期越晚,越容易发生复发与转移(X2=149.6,P=0.000)；未接受化学治疗的患者较接受化学治疗的患者,其复发转移率高(X2=7.435,P=0.006)。与性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤体积大小、肿瘤浸润深度、接受放疗无关(X2=0.344,P=0.558；X2=3.336,P=0.068；X2=0.042,P=0.837；X2=0.005,P=0.943；X2=2.594,P=0.107；X2=2.031,P=0.154)。患者生存预后与淋巴结转移、临床分期、复发转移密切相关。发现淋巴结转移者较未发现者生存时间缩短(P=0.000)；临床分期越晚,生存时间越短(P=0.000)；存在复发转移者,生存时间较未发现者缩短(P=0.000)。生存预后与性别、年龄、部位、大小、浸润深度、病理分级、放疗、化疗无关(P=0.969；P=0.406；P=0.131；P=0.580；P=0.531；P=0.067；P=0.333；P=0.207)。2.NGAL、E-cadherin、MMP-9在结肠癌中的表达及其与复发转移的关系2.1 NGAL在结肠癌中的表达NGAL阳性表达产物呈棕黄色,主要定位于细胞浆,呈弥漫分布。阳性表达染色指数在复发、转移组与无复发、转移两组间差别有统计学意义,转移与复发组高于无转移与复发组(Z=-2.150,P=0.032)。NGAL表达与淋巴结转移、复发转移、临床分期密切相关。存在淋巴结转移和复发转移的情况下,NGAL表达增高(X2=5.080,P=0.024；X2=5.367,P=0.021)；临床分期越晚,NGAL表达随之增高(X2=5.706,P=0.017)。NGAL表达与性别、年龄、部位、大小、深度、病理分级、临床分期、放疗、化疗无关(X2=1.002,P=0.317；X2=0.012,P=0.914；X2=0.243,P=0.622；X=0.135,P=0.713；X2=0.033,P=0.857；X2=0.571,P=0.450；X2=0.376,P=0.540；X2=0.459,P=0.498)。2.2 E-cadherin在结肠癌中的表达阳性表达产物主要表达于结肠癌的细胞膜与细胞浆上,呈棕黄色,复发与转移组E-cadherin部分细胞表达缺失,E-cadherin的阳性表达指数低于无复发与转移组(Z=-2.164,P=0.030)。E-cadherin表达与年龄、淋巴结转移、病理分级、复发转移、临床分期、放疗密切相关。随着年龄增长,59岁以上结肠癌患者E-cadherin表达较59岁以下者增高(X2=5.727,P=0.017)；存在淋巴结转移和复发转移的情况下,E-cadherin表达降低(X2=6.000,P=0.014；X2=4.002,P=0.045)；随着病理分级和临床分期的递进,E-cadherin表达随之降低(X2=13.892,P=0.000；X2=3.943,P=0.047)；进行过放射治疗的患者,E-cadherin表达增高(X2=4.854,P=0.028)。E-cadherin表达与性别、部位、大小、深度、化疗无关(X2=0.294,P=0.588；X2=2.090,P=0.148；X2=0.036,P=0.849；X2=2.456,P=0.117；X2=3.515,P=0.061)。2.3 MMP-9在结肠癌中的表达阳性表达产物主要表达于细胞浆,呈棕黄色。其在复发、转移组与无复发、转移组间差别具有统计学意义,转移与复发组高于无转移与复发组(Z=-3.735,P=0.000)。MMP-9表达与肿瘤大小、复发转移密切相关。随着肿瘤体积增大,MMP-9表达随之增高(X2=4.435,P=0.035)；存在复发转移的患者,其MMP-9表达增高(X2=4.017,P=0.045)。MMP-9表达与性别、年龄、部位、深度、淋巴结转移、病理分级、临床分期、放疗、化疗无关(X2=0.346,P=0.556；X2=0.015,P=0.902；X2=1.919,P=0.166；X2=0.002,P=0.967；X2=0.263,P=0.608；X2=0.150,P=0.699；X2=0.999,P=0.318；X2=0.666,P=0.414；X2=3.225,P=0.073)。3. NGAL、E-cadherin和MMP-9与生存预后的关系经Kaplan-Meier生存分析和对数秩和检验(Log-rank test)结果显示：NGAL、MMP-9阳性组的平均生存时间分别为(47.427±2.505)个月、(48.081±2.672)个月,中位生存时间分别为37、35个月,阴性组平均生存时间为(65.714±3.616)个月、(69.598±2.073)个月,中位生存时间分别为77、75个月,NGAL、MMP-9阳性组生存期比阴性组缩短差异有统计学意义(P=0.000,P=0.010)。E-cadherin阳性组平均生存时间为(61.587±2.805)个月,中位生存时间为61个月,阴性组为(36.535±2.946)个月,中位生存时间为23个月,E-cadherin阴性组生存时间比阳性组缩短有统计学意义(P=0.000)。结论1.术后复发与转移与术前存在淋巴结转移、病理分级、临床分期、接受化疗密切相关。存在淋巴结转移的患者其更易发生复发与转移；病理分级越高,越容易发生复发与转移；临床分期越晚,越容易发生复发与转移；未接受化学治疗的患者较接受化学治疗的患者,其复发转移率高。与性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤体积大小、肿瘤浸润深度、接受放疗无关。患者生存预后与术前存在淋巴结转移、临床分期、术后复发转移密切相关。术前存在淋巴结转移者较不存在者生存时间缩短；临床分期越晚,生存时间越短；术后复发转移者,生存时间缩短。生存预后与性别、年龄、部位、大小、浸润深度、病理分级、放疗、化疗无关。2. NGAL下调E-cadherin表达,而E-cadherin作为重要的钙离子依赖性的上皮粘附分子,其表达下调或缺失,癌细胞间粘附力下降或缺失,容易从原发灶脱落分离,有利于癌细胞侵袭性生长和远处转移,患者预后不良。3.MMP-9对细胞外基质的降解是恶变细胞完成浸润和转移的前提,NGAL在恶变细胞中的显著过表达与其调节保护MMP-9,并以此促进恶变细胞的浸润转移密切相关,造成患者预后不良。