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目的研究乳腺癌MCF-7细胞中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)信号通路,筛选抑制乳腺癌细胞增殖的多肽适配体,从而探索治疗乳腺癌的潜在靶点。方法运用免疫荧光与蛋白质印迹(western blotting)检测NGF及其高亲和力受体TrkA(酪氨酸激酶受体A)在MCF-7细胞中的表达;运用细胞计数方法(cellcounting kit-8,CCK-8)检测不同浓度的NGF阻断剂Ro 08-2750和酪氨酸酶阻断剂K252a对细胞增殖和存活的影响;运用western blotting检测不同浓度Ro 08-2750处理后的细胞表达活性促分裂素原活化蛋白激酶(active-mitogen-activated proteinkinases,active-MAPK)与p53蛋白变化情况;运用流式细胞仪检测不同浓度Ro08-2750处理后的细胞凋亡情况以及细胞周期分布的变化;运用多肽适配体技术将5种特异性结合Ras蛋白不同位点的多肽适配体转染MCF-7细胞,并运用CCK-8法检测MCF-7细胞转染后的增殖情况,运用western blotting检测表达active-MAPK蛋白与p53蛋白的变化,以及运用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果实验结果显示MCF-7细胞同时表达NGF及其受体TrkA蛋白;NGF阻断剂Ro 08-2750能够明显地抑制细胞增殖与存活,并具有剂量效应;经不同浓度Ro08-2750处理细胞后p-ERK 1/2表达量上调,p53表达下调,细胞出现凋亡峰,并出现S期细胞含量上升,62期细胞含量下降:转染的5种多肽适配体中,pPER39R能明显抑制细胞的增殖和存活,p53的表达上调,并出现显著的凋亡峰,然而pPER39R对正常背根神经节细胞DRG(dorsal root ganglion)细胞没有任何抑制作用。结论乳腺癌MCF-7细胞中存在NGF信号通路,当使用特异性的NGF阻断剂Ro 08-2750处理,MCF-7细胞的增殖和存活受到明显抑制,出现S期停滞与细胞凋亡;通过对结合Ras的的多肽适配体的筛选,pPER39R可以明显抑制MCF-7细胞的增殖与存活且引起细胞的凋亡,这个结果可能与引起p53上调有关。并且pPER39R对存在正常NGF信号通路的DRG细胞没有任何抑制效应。提示pPER 39R具有突变Ras的抑制特异性,具有进一步深入研究的较大价值。