【摘 要】
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本文采用湖南、广东、安徽等地采集的乌桕(Sapium sebiferum)优株种子进行播种育苗,形态特性与DNA分析相结合对乌桕优株进行遗传多样性研究。观测优株种子及其幼苗的生物学特
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本文采用湖南、广东、安徽等地采集的乌桕(Sapium sebiferum)优株种子进行播种育苗,形态特性与DNA分析相结合对乌桕优株进行遗传多样性研究。观测优株种子及其幼苗的生物学特性,并以幼苗叶片为材料,应用ISSR分子标记技术对6个种源的32个优株遗传特性进行分析。建立起乌桕ISSR-PCR反应体系,探讨了种源内及种源间的遗传变异及分化,为乌桕优良种质资源选择提供理论依据。主要结果如下：(1)不同种源优株子代1年生幼苗苗高、地径生长呈显著差异；根据幼苗1年生长规律,将乌桕幼苗生长划分为4个生长阶段；根据种子含油率和幼苗生长状况,优株21“综合表现最佳。(2)采用单因子和L16(45)正交试验相结合,确立了普适性较强的PCR反应体系(20μL):Mg2+3.0mmol/L, dNTP0.35mmol/L,引物0.7μmol/L, Taq聚合酶2.5U, DNA模板75ng,并含有2μL10×buffer(Mg2+free),退火温度为50～56℃。(3)利用筛选出的10条ISSR引物对乌桕不同种源32个样本进行了遗传结构分析,共检测到125个位点,其中多态性位点数为118个,比率高达94.40%,表现出乌桕优株丰富的遗传多样性。(4)应用PopGen32软件分析乌桕遗传变异,得出有效等位基因(Ne)为1.4731,基因多样性指数(H)为0.2822,Shannon多样性指数(I)为0.4321,说明在物种水平上乌桕具有较高的遗传多样性。乌桕总种群基因多样性(Ht)为0.2586,群内的基因多样性(Hs)为0.1450,遗传分化系数(Gst)为0.4395,即群体间的变异占43.95%,而群体内的变异占56.05%,说明群体内和群体间都存在较大变异。(5)通过不同种源间UPGMA聚类图得出,聚类与种源地的相关性不显著。运用NTSYS软件分析,得到不同乌桕优株的遗传相似性系数范围在0.368～1.000,获得了亲缘关系最近的3#和6#、20#和21#,结合表型分析可知同21#亲缘关系较近的优株都具有较优的物种条件,只是在时间和空间上还在适应中。构建了32个乌桕优株的遗传关系聚类图,并将其分为3大类,结果表明优株间存在丰富的遗传变异,且亲缘关系的远近与地理距离无显著相关性。
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