一株产碱性磷酸酶菌株的分离鉴定及发酵条件研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haihaiboyfei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,EC3.1.3.1,简称ALP)是一种底物专一性较低的、裂解有机磷化合物释放无机磷的磷酸单脂酶。碱性磷酸酶在酶联免疫测定、生物传感器、非同位素探针、杂交和测序方面有广泛应用。在分子生物学方面,碱性磷酸酶分解核酸的末端磷酸盐,是遗传工程的有用工具酶。碱性磷酸酶还在有机磷农药降解中起到非常重要的作用。碱性磷酸酶主要存在于人体、动物、植物和微生物中。目前商业碱性磷酸酶大多产自动物体(小牛肠碱性磷酸酶)或植物体(麦芽),产率低,价格昂贵;有些热稳定性差,使它的使用受到了限制。为了获得具有自主产权的产率高、热稳定性好的碱性磷酸酶,本研究从32株细菌中分离筛选到一株热稳定性较好的产碱性磷酸酶的菌株HB1,对其进行了鉴定,并进一步研究了该菌株的产酶条件,主要实验结果如下:1.产碱性磷酸酶菌株的分离、筛选从土壤分离的(12株)和浙江大学应用微生物学研究室已有保存菌株(20株)共32株菌中用微孔板法初筛,获得三株碱性磷酸酶活性较高的菌株HB1、1#、B7。磷酸苯二纳法测酶活复筛后确定菌株HB1产酶活性最高。该菌株主要产胞外碱性磷酸酶,并发现该酶具有较好的热稳定性。2.产酶菌株的鉴定通过对菌株HB1的形态学观察,生理生化特性测定,DNA中G+C mol%含量,16S rDNA测序和比对分析,确定菌株HB1属于芽胞杆菌属(Bacillus.sp)的一个种。3.菌株HB1产酶发酵条件的优化用摇瓶批量发酵法测得HB1发酵的最佳培养基为:葡萄糖,6g;酵母粉,8g;MgSO4·7H2O,0.5g;NaCl,1g;水,1000mL;pH 7.5。最适培养条件为:培养温度30℃,装液量为100mL三角瓶装25mL培养液,于120rpm转速下培养24h。在此条件下,发酵上清液酶活性可达2.25U/mL。本研究分离到的产酶菌株为发酵生产碱性磷酸酶提供了微生物资源;优化发酵试验结果为利用该菌发酵生产碱性磷酸酶提供了实验室小试参数。
其他文献
青岛市嘉峪关学校是中国教育学会在我国东部的第一所教师发展学校。我们建设教师发展学校制度的经验主要包括:探索教师需求,确立教师发展目标;求真务实,探索教师发展学校“二
在实验室尺度范围内对四川某城市医疗废物焚烧飞灰的特性和采用水泥固化焚烧飞灰的预处理效果进行了研究。分析了飞灰中重金属的总体浸出特性和不同粒径范围内的浸出特性,以及
随着科技的发展,对于城市的建设也变得越来越快,能源的问题则变得很突出。电梯在人们的生活中得到了广泛的应用,因此对于电梯节能方面进行研究对于能源的节约显得有着重要的
目的:对消化性溃疡合并上消化道出血的相关危险因素进行分析。方法:选取茂名市茂南区人民医院收治的75例消化性溃疡合并上消化道出血的患者作为观察组,同时选取249例消化性溃
企业文化必须融入社会文化的发展,并承担起社会文化赋予的使命和责任。因此,企业文化除了理论界通常所说的精神文化、制度文化、物质文化和行为文化这四个层面,还应增加第五
习近平总书记指出,幸福不会从天降。好日子是干出来的。脱贫致富终究要靠贫困群众用自己的辛勤劳动来实现。内因是起决定作用的因素,贫困农村立足当地实际激发贫困群众内生动
报纸
随着信息技术飞速发展,网络成为人们生活中必不可或缺的一部分,而"零零后"的大学生更是网络的主力军,网络已经成为他们学习、生活中获取信息的重要来源。网络给人们带来了方
人大代表作为人民代表大会制度的核心,在参与国家事务管理、社会治理和改善政府公共服务方面,具有其他组织、群体或者个人无法比拟的政治优势、资源优势、组织优势,也能够为
以临安市为例,研究“十二五”时期县域产业发展方向,以期在研究思路、研究方法及产业发展理念上为同类县(市)提供有价值的参考。“十二五”时期,临安产业发展将面临新的机遇和挑战
我国经济高速发展的同时环境问题也已日益突出,由于我国的能源结构中以煤炭为主,因此目前大气污染仍然是以烟尘为主。随着社会的不断进步和人们环保意识的提高,袋式除尘器的得到