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目的:脑梗死严重威胁着人类健康,探讨脑梗死的病理生理学机制,寻求有效的治疗手段是研究的热点。随着认识的不断深入,人们提出了缺血半暗带的概念和缺血再灌注损伤级联反应学说。脑缺血再灌注损伤机制包括相互承启、交互作用的数个机制,如兴奋性氨基酸毒性作用、炎症、细胞凋亡等。半暗带是无灌注的中心区和正常组织间的移行区,它不是静止的,随时间和治疗的进行,比如溶栓治疗,其大小发生改变。在以上研究中,血小板衍生生长因子(PDGF)的作用引起人们的重视。作为一种具有多种生物学功能的细胞因子,PDGF广泛参与脑梗死的病理生理过程,国内外学者对PDGF-BB在肿瘤发生、肺纤维化、动脉粥样硬化、创伤修复等病理过程中所起的作用研究较多,但对它在脑缺血再灌注损伤中的实验研究很少。因此本实验通过建立脑缺血再灌注动物模型,探讨PDGF-BB的表达及其意义,寻求有效的神经保护剂。方法:60只健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠,体重250～300 g,随机分成2组:①大脑中动脉闭塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion, MCAO/R)组:按再灌注后不同时间点分为MCAO 3 h/R 6 h、MCAO 3 h/R 24 h、MCAO3 h/R 48 h、MCAO 3 h/R 72 h和MCAO 3 h/R 7 d五个亚组,n=6;②假手术组:按MCAO后不同时间点分为6 h、24 h、48 h、72 h和7 d五个亚组,n=6。MCAO/R组,按照改良的拴线法建立大脑中动脉缺血再灌注动物模型;假手术组,除不插线外其余操作同缺血再灌注组。于MCAO/R后6 h、24 h、48 h、72 h、7 d采用Longa评分法、Berderson评分法、平衡木评分法3种方法进行行为学评分;行为学评分后断头取脑,冠状切除双侧嗅球和额极前部4 mm,剩余大脑部分冠状切开,前部约2 mm厚的脑组织从中线切开,分别测定左右两侧湿重,再经过95～110℃烘干24 h后测定干重。脑组织含水量=(脑组织湿重-脑组织干重)/脑组织湿重×100%;余脑组织固定后,包埋制成蜡块,采用石蜡冠状切片,切片厚约4μm,常规苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织的病理改变,应用免疫组化法检测血肿周围脑组织不同时间点PDGF-BB的表达。结果:1行为学评分:脑缺血再灌注后大鼠手术对侧肢体存在不同程度行为学异常,其中6 h与假手术组相比无明显差异,考虑为麻醉药品和手术创伤所致,24 h后评分趋于稳定,24～72 h行为学异常与假手术组相比神经功能缺损明显,提示行为学异常与脑损害程度一致,7 d时神经功能基本恢复正常。2脑组织含水量测定:①MCAO/R组病灶侧与对照组病灶侧(77.62±0.174)相比,R 6 h组为79.58±0.179,P>0.05,无统计学意义;R 24 h组为82.42±0.118,P<0.05,有统计学意义;R 48 h组为85.40±0.099,P<0.05,有统计学意义;R 72 h组为84.87±0.154,P<0.05,有统计学意义;R 7 d组为80.87±1.846,P>0.05,无统计学意义。②MCAO/R组病灶同侧与对侧脑组织含水量相比,病灶同侧脑组织含水量高于病灶对侧脑组织含水量,R 6 h组病灶侧为79.58±0.179,对侧为78.05±0.117,P>0.05,无统计学意义;R 24 h组病灶侧为82.42±0.118,对侧为78.75±0.055,P<0.05,有统计学意义;R 48 h组病灶侧为85.40±0.099,对侧为78.32±0.094,P<0.05,有统计学意义;R 72 h组病灶侧为84.87±0.154,对侧为79.26±0.242,P<0.05,有统计学意义;R 7 d组病灶侧为80.87±1.846,对侧为79.35±0.224,P>0.05,无统计学意义。③对照组各时间点之间无统计学差别, P>0.05。MCAO/R组到第7 d脑组织含水量逐渐回落。3脑组织切片HE染色观察:假手术组无梗死灶,神经元结构、形态正常,无间质水肿。MCAO/R组可见缺血中心区组织疏松,形似海绵;神经元胞体缩小,变形、核固缩;间质水肿明显;随时间延长多形核白细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)浸润增多,胶质细胞逐渐增多。其中PMN浸润在R 72 h最明显,R 7 d组可见胶质细胞增生明显。4脑组织PDGF-BB的表达:PDGF-BB在假手术组脑组织神经元、室管膜和脑室脉络丛上皮细胞有弱阳性表达。①MCAO/R组与假手术组相比较,R 6 h组为11.83±1.60,假手术组为5.52±1.78,P<0.05,有统计学意义;R 24 h组为15.67±2.07,假手术组为6.02±1.99,P<0.05,有统计学意义;R 48 h组为22.67±1.63,假手术组为5.89±1.45,P<0.05,有统计学意义;R 72 h组为25.33±2.51,假手术组为5.69±1.86,P<0.05,有统计学意义;R 7 d组为28.83±3.19,假手术组为6.13±2.01,P<0.05,有统计学意义。②MCAO/R组内各亚组间比较,各亚组间均有差异性,P<0.05,其中,MCAO 3 h/R 6 h亚组(11.83±1.60)与MCAO 3 h/R 24 h亚组(15.67±2.07)有显著差异性,P<0.01结论:脑缺血再灌注损伤诱导PDGF-BB的表达代偿性持续性上调,PDGF-BB参加了脑缺血/再灌注后的脑细胞级联反应,它可以自我保护、自我调节,并可能与血管重塑有关,尤其在缺血半暗带区,以促进血管再生、神经细胞保护以及水肿抑制,促进损伤修复,起到神经保护因子的重要作用。