中国番茄黄化曲叶病毒与烟草曲茎病毒卫星DNAβ分子上症状决定因子的定位

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双生病毒是一类具有孪生颗粒形态的植物单链DNA病毒,目前双生病毒病害已在多个国家和地区的作物上造成严重危害。近年来,我国华南各省作物上双生病毒病害的发生有逐年加重的趋势,并且在华东的浙江和上海等地也已陆续发现这类病毒。中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)和烟草曲茎病毒(TbCSV)病害复合体在烟属寄主上能诱导不同的症状表型:TbCSV病害复合体诱导产生叶片下卷和植株矮化等表型;而TYLCCNV病害复合体则除能诱导以上症状,还能诱导叶背面沿着叶脉形成耳突的特有症状。假重组实验发现,耳突的表型是与TYLCCNV DNAβ相伴随的。本文对中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)以及烟草曲茎病毒Y35分离物(TbCSV-Y35)的DNAβ分子的症状决定因子进行了研究。本文利用Overlap Extension PCR的方法对两个卫星的启动子与A富含区这一段约430nt的片段进行了互换,构建了嵌合体卫星分子Y10-35AP(Y10β上置换了Y35β的启动子和A富含区)和Y35-10AP(Y35β上置换了Y10β的启动子和A富含区。嵌合体卫星分子Y10-35AP与TbCSV-Y35或TYLCCNV-Y10共同接种均能产生耳突的表型;而嵌合体卫星分子Y35-10AP与TbCSV-Y35或TYLCCNV-Y10共同接种只能产生与TbCSV-Y35及其DNAβ类似的叶片皱缩、曲叶和植株矮化等双生病毒的典型症状。嵌合体卫星分子Y10-35AP与TbCSV-Y35和TYLCCNV-Y10共同接种后,还出现脉间肿表型。以上结果表明,耳突与双生病毒卫星分子DNAβ的βC1的相伴随,βC1的启动子类型也能影响诱导症状的形成和表型。
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