【摘 要】
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目的:目前冠脉造影(Coronary angiography,CAG)广泛应用于诊断冠心病。课题组前期研究结果显示,造影剂可使人脐静脉内皮细胞(HUVECs)发生炎症、氧化损伤及凋亡等反应。本实验通过观察碘克沙醇对RAW264.7巨噬细胞炎症及氧化损伤等反应,初步探讨碘克沙醇对于单核细胞激活的可能机制。方法:细胞实验:体外培养RAW264.7巨噬细胞,并与造影剂(碘克沙醇注射液)共同孵育。使用活性
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目的:目前冠脉造影(Coronary angiography,CAG)广泛应用于诊断冠心病。课题组前期研究结果显示,造影剂可使人脐静脉内皮细胞(HUVECs)发生炎症、氧化损伤及凋亡等反应。本实验通过观察碘克沙醇对RAW264.7巨噬细胞炎症及氧化损伤等反应,初步探讨碘克沙醇对于单核细胞激活的可能机制。方法:细胞实验:体外培养RAW264.7巨噬细胞,并与造影剂(碘克沙醇注射液)共同孵育。使用活性氧探针,即双氢乙酰乙酸一二氯荧光黄(Dihydroacetoacetic acid dichlorofluorescent yellow,DCFH-DA)检测单核巨噬细胞中活性氧(Reactive oxygen species ROS)的释放;利用Transwell小室评估RAW264.7巨噬细胞迁移能力;运用Western blotting技术检测氧化应激相关蛋白,NADPH 氧化酶活化蛋白 p47(NADPH oxidase activating protein p47)、磷酸化细胞核因子 NF-KB p65(Phosphorylated nuclear factor NF-kB p65)等蛋白的表达;动物实验:雄性SD大鼠通过尾静脉分别注射PBS和碘克沙醇,随机分为对照组(PBS组)和造影剂组(碘克沙醇注射液),处死动物取肾脏切片进行形态学观察。结果:碘克沙醇在体外能够激活单核巨噬细胞中PKC、P65、NOX活化表达,并诱导RAW264.7巨噬细胞ROS释放增加,以及促进细胞迁移增多;在体内碘克沙醇导致大鼠肾脏发生结构紊乱、间质水肿和细胞坏死等损伤。结论:碘克沙醇可能通过激活NF-KB、PKC通路,促使NOX活化表达,诱导单核巨噬细胞发生氧化损伤,并促使细胞迁移,可导致肾脏发生结构紊乱、间质水肿和细胞坏死等损伤。
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