巴戟天多糖的分离纯化及其免疫活性的研究

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巴戟天为茜草科多生藤本植物,肉质根可入药.该论文对其药用活性物质——巴戟天多糖的提取方法、分离纯化及免疫活性进行了探讨,主要的研究内容和结果如下:(1)巴戟天粗多糖的传统浸取工艺条件的研究研究了巴戟天粉末原料水浴浸提的工艺条件,正交实验确定提取条件为提取温度为60℃、液固比为20:1、颗粒大小为40~60目、提取时间为30min、一次提取就可以达到较高的提取效果.考虑到巴戟天含糖分多,干燥的细小粉末容易吸潮粘结成团,工业化生产过程中一般不宜将原料制成细小的粉末,而一般将其制成片状原料进行生产,因此,该论文还考察了片状原料在提取过程中的最优提取工艺条件,正交实验结果表明,片状原料最优提取工艺条件为提取温度为70℃、液固比为20:1、提取时间为60min,两次提取能达到较高的提取效果.(2)微波强化条件下巴戟天粗多糖提取工艺的研究采用响应面分析法较系统地研究了微波强化条件下巴戟天粗多糖的提取工艺,得到了在一定条件变化范围内多糖提取率随微波功率、提取时间和液固比的变化规律(回归方程)及相应的粗多糖提取率响应面和等高线图,实验结果表明:当微波功率为700W,提取时间为4.5min,液固比为28:1,最大的粗多糖提取率为39.25﹪.(3)巴戟天粗多糖分离纯化工艺的研究采用活性炭对提取液进行脱色,正交实验表明最佳脱色工艺条件为:pH值为6.5、活性炭用量为1﹪、脱色时间为30min、脱色温度为60℃.比较了不同脱蛋白方法的脱蛋白效果及相应的粗多糖的损失情况,结果表明,巴戟天提取液脱蛋白以三氯乙酸-正丁醇法效果最好,脱蛋白一次可使原提取液中蛋白质浓度从0.607mg/ml降低到0.285mg/ml.乙醇沉淀过程中乙醇浓度控制在60~70﹪为宜.巴戟天多糖经过Sephacryl S-400凝胶柱层析纯化,得到均一组分,命名为MOP.(4)对MOP的免疫活性进行初步的探讨考察了MOP对幼年小鼠的三项免疫指标:小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力、淋巴细胞转化率以及小鼠胸腺和脾脏的重量这三个免疫指标的影响.结果表明,中剂量组的药效就可以达到阳性对照组的效果,增加剂量其作用效果可以经一步增加.但是并非剂量越高越好,合适的剂量水平还有待于结合毒性实验进一步探讨.
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