皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶mRNA及蛋白表达的影响

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糖皮质激素对肝再生具有重要而复杂的影响,但其作用机理目前还没有完全弄清楚。本文以成年雄性Sprague-Dawley大鼠(体重180-200g)为材料,研究了大鼠体内主要的糖皮质激素——皮质酮对部分肝切除(partial hepatectomy,PH)诱导的早期再生肝抗酶mRNA及其蛋白表达的影响,旨在为探讨糖皮质激素在肝再生中的作用和地位提供资料。大鼠随机分为5组:对照组(去肾上腺假手术组)、去肾上腺手术组、10、20和40 mg/kg体重外源皮质酮处理的去肾上腺手术组。PH前3天对大鼠进行双侧肾上腺切除手术,皮质酮悬浮于芝麻油中形成不同浓度,于PH前12 h皮下注射去肾上腺鼠,12 h后再注射一次。再生肝抗酶mRNA及其蛋白水平的测定分别采用RT-PCR和Western blotting法。结果如下:(1)对照组完整肝脏中(PH 0 h)抗酶mRNA水平相对较低,PH后升高,3 h达到峰值,5 h出现明显下降,7 h再次升高并达到峰值,之后缓慢下降,12 h回到基础水平。(2)PH后,去肾上腺手术组及10或20 mg/kg体重皮质酮处理组抗酶mRNA水平的变化趋势与对照组相似,与各相应时间点对照组相比,mRNA含量无显著性变化(P﹥0.05)。(3)与对照组相比,40 mg/kg体重皮质酮处理组抗酶mRNA水平显著升高(PH后7 h除外)(P﹤0.05或P﹤0.01),峰值出现在PH后5 h,之后下降。(4)对照组抗酶蛋白水平的变化趋势与其相应的mRNA水平变化趋势相一致。而与之相比,去肾上腺手术组的抗酶蛋白含量在PH后5、7、9 h则出现显著下降(P﹤0.05)。(5)不同剂量外源皮质酮处理后,抗酶蛋白水平的变化趋势发生明显改变,PH后持续升高,5 h达到高峰,之后缓慢下降。与对照组相比,各皮质酮处理组抗酶蛋白含量在所观察的整个实验过程中均显著升高(P﹤0.01),如在PH后5 h,10、20和40 mg/kg体重皮质酮处理组抗酶蛋白水平分别比同时间点对照组高43%、79%和95%。上述结果表明,外源皮质酮对大鼠早期再生肝抗酶蛋白的合成具有剂量依赖性促进作用;10、20 mg/kg体重的外源皮质酮对抗酶mRNA水平影响不大,而高剂量(40 mg/kg)皮质酮处理可刺激抗酶基因转录。
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