目的:网络药理学-药物共同作用成分靶点的分析在分子生物学水平探究清润颗粒的药理作用;分析探究中药颗粒剂清润颗粒的饮片最佳提取工艺、清润颗粒生粉最佳赋型工艺;对清润颗粒止咳、化痰、抗炎、免疫调节的药理作用作用进行药效学验证,为临床研究提供基础实验依据。材料与方法:1.运用现代网络药理学实验数据库,探索清润颗粒主要药物成分药分子水平药效学作用机制。2.采用正交设计,基于君臣佐使的传统组方原则与现代药理学研究内容对蜜百部,苦杏仁,北沙参,浙贝母,桑叶,甘草等主要药物药理学成分进行加热冷凝回流提取,蒸发浓缩后干燥制成干膏,对干膏研磨粉碎,过80目药典筛成粉备用,对四种主要成分对叶百部碱、苦杏仁苷、甘草酸铵进行HPLC高效液相成分分析,依据成分分析结果和得膏率进行AHP层次分析加权评分计算优化最佳提取工艺。3.在最佳提取工艺的基础上,依据2020版中国药典四部颗粒剂的赋型工艺指导原则与要求进行清润颗粒生粉的赋型工艺研究,研究生药与糊精的比例为1:1、1:2、1:3、1:4的不同药辅比情况下成型率、吸湿率、溶解性的差异,从而得出实验室中清润颗粒的最佳赋型工艺。4.对2最佳提取工艺所得的生粉进行止咳、化痰、抗炎、免疫调节的药效学实验验证,将96只SPF级BABL/c小鼠,4～6周龄,随机分成清润止咳实验组、化痰实验组、抗炎实验组,免疫调节实验组,每组按照给药方式分为清润组、西药组、空白组。止咳实验组采用氨水引咳法诱发在饱和浓氨水玻璃缸内的各组小鼠咳嗽,记录引咳潜伏期与五分钟内咳嗽次数;化痰实验组采用苯酚红排泌法,予小鼠腹腔注射苯酚红溶液,一段时间后剥离完整等长气管置于碳酸氢钠溶液,离心震荡,保证气管中苯酚红完全释放,离心后上清液液备用,以蒸馏水为空白调零,在紫外分光光度计下测定各组上清液的OD值,另称取一定量苯酚红采用倍比稀释得到等浓度梯度的苯酚红碳酸氢钠标准溶液,测定OD值,以OD值为纵坐标,苯酚红浓度为横坐标建立拟合函数,根据标准曲线方程与上清液OD值计算苯酚红含量,根据小鼠体重计算校正酚红含量,比较化痰率。抗炎实验组采用二甲苯涂抹小鼠左耳耳廓致炎,打孔器分别在左右耳相同部位打下6mm圆耳片,称重,计算差值。免疫调节实验组进行血清溶血素试验,SRBC致敏后小鼠后眼眶取血,离心得到血清,对血清中的抗绵羊红细胞抗体进行血凝法定性分析与抗体OD值检测法定量分析。结果:1.网络可视化结果:与清润颗粒药物作用关系最为密切的靶点基因为CDRT15L2、PGLYRP-4、STYXL1,CDRT与细胞增殖调控有关,PGLYRPs家族、与STYXL1与炎症反应和免疫过程有关。2.最佳提取工艺:清润颗粒的最佳提取工艺8倍量70%乙醇作为溶解剂加热冷凝回流法3h、3次提取。3.最佳赋形工艺:清润颗粒生粉与糊精比例为1:3,85%乙醇作为粘合剂,湿法制粒。4.药效学实验验证结果:止咳组:清润颗粒有延长小鼠的引咳潜伏期,提高小鼠呼吸道对浓氨水刺激的耐受程度;减少浓氨水刺激后的咳嗽次数,浓氨水刺激后造成的小鼠应激性咳嗽具有时效性,在20s～180s内三组之间有明显差异。化痰组:各实验组化痰率:清润组=121.995%、西药组=140.497%、空白组=100%,清润颗粒可促进气管内痰液的排出增加化痰率。抗炎组:左右耳片重量差:实验组与空白组比较,左右耳片重量差值减小,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫调节组:血清溶血素试验抗体生成量西药组大于清润组,差异有统计学意义（P<0.05）,清润组大于空白组,差异有统计学意义（P<0.05）。血清溶血素凝集试验地塞米松组﹥清润颗粒组﹥生理盐水组。结论:1.清润颗粒复方药成分-靶点网络可视化可以从分子生物学角度阐释药物作用的内在机制,为药效验证提供思路。2.AHP层次分析加权评分法有利于中药饮片有效成分提取的优化,方便中药药学研究。3.在实验室湿法制粒赋形工艺的探索中,影响成型工艺的因素包括辅料种类,药辅比,粘合剂类型,添加剂的选择,但影响成型的最关键因素为生粉与辅料的比例,对药厂批量生产的赋形工艺探索提供借鉴意义。4.验证了清润颗粒的止咳、化痰、抗炎、免疫调节作用的强弱性,依据止咳作用的实验流程与步骤及分析方法,为验证清润颗粒平喘作用的药效学作用奠定基础。