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目的:探讨黄芩素对顺铂诱导胃黏膜损伤的保护作用,并阐明其可能的作用机制,为今后黄芩素在临床上的应用,尤其是减轻顺铂的胃肠道副作用提供必要的的理论基础和实验依据。材料与方法:选用18-22g健康雄性C57小鼠30只,随机分为3组,对照组,顺铂组,顺铂+黄芩素组,每组各10只小鼠,分笼饲养,自由饮食水。本实验对照组连续6天腹腔注射生理盐水,顺铂组,顺铂27mg/kg,分别在实验的第1、4天腹腔各注射一次,黄芩素组顺铂给药剂量及方式同顺铂组,并且连续6天腹腔注射黄芩素50mg/kg,第6天注射完毕后,所有组动物禁食食物及水24h后处死,留取小鼠血液及完整胃组织。从给药开始至处死期间,每天分别称取每组小鼠体重并记录,计算每只小鼠给药前后的体重增减值,观察小鼠胃黏膜损伤情况,计算小鼠胃黏膜损伤指数,运用HE染色、ELISA、Western-Blot,检测小鼠胃组织及血液中相关炎症因子及其蛋白表达的情况。结果:大体观察结果发现对照组小鼠精神状态正常,被毛光滑,活跃好动,能主动觅食,粪便呈深棕色颗粒,无其他症状;顺铂组小鼠精神萎靡,摄食量明显减少,活动明显减少,毛发无光泽且稀疏脱落,出现稀便,易激惹,暴躁,有咬笼等症状;黄芩素组小鼠精神较顺铂组良好,活动度未见明显减少,毛发未见明显脱落且有光泽,未见明显稀便;与对照组相比,顺铂组小鼠体重明显减轻,而黄芩素组体重减轻较顺铂组有所改善(p<0.05);对照组小鼠胃黏膜表面呈现淡红色,表面光滑、完整,无充血水肿及破损,无出血点,无毛细血管扩张;顺铂组可见胃膨大胀气,有大量食物残留,胃黏膜损伤严重,呈现鲜红色,局部病变,红肿,黏膜表面可见少量的出血点,损伤指数评分高于对照组(p<0.05);黄芩素组胃无明显食物残留,未见明显的胀气,较顺铂组小鼠胃黏膜组织病变减轻,黏膜呈现粉红色,完整无破损,无明显点状出血,损伤指数评分低于顺铂组(p<0.05);对照组胃黏膜腺体结构完整,细胞排列整齐,毛细血管丰富,各层之间连续清楚,未见炎症细胞浸润;顺铂组胃黏膜腺体结构被破坏,大部分脱落,细胞排列无序,血管破裂且可见大量红细胞浸润,粘膜下可见炎细胞浸润;而黄芩素组胃黏膜腺体完整或偶见脱落,腺体排列较完整,未见红细胞浸润,毛细血管少量被破坏,炎症细胞较顺铂组明显减少;与对照组相比,顺铂组炎症因子IL-1β,IL-6,IL-1β,IL-8,TNF-α表达显著升高,黄芩素处理后,IL-1β,IL-6,IL-8,TNF-α表达显著低于顺铂组,差异有统计学意义(p<0.05);与对照组比较,顺铂组Caspase3,Caspase9,p53,Bax表达较对照组含量均明显升高,且黄芩素组低于顺铂组但高于对照组(p<0.05),Bcl-2蛋白表达黄芩素组及对照组均高于顺铂组(p<0.05);p38三组之间无明显差异(p(29)0.05),但与对照组相比p-p38蛋白表达明显升高,黄芩素治疗后,p-p38的表达与顺铂组相比明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:黄芩素可抑制由顺铂诱导的炎症因子IL-1β,IL-6,IL-8,TNF-α的表达;黄芩素可通过抑制Caspase3,Caspase9,p53凋亡蛋白的表达以及Bax/Bcl-2失衡,调控顺铂诱导的小鼠胃肠黏膜细胞的凋亡;黄芩素可下调p38MAPK通路,抑制p38MAPK通路的磷酸化,减轻顺铂诱导的胃肠黏膜损伤。
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