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目的:采用基因芯片技术,初步探究与细胞增殖、凋亡和信号转导有密切关系的四大类主要原癌基因在原始卵泡启动生长中的作用。方法:(1)取出生2d的SD大鼠卵巢,分别在50ng/ml表皮生长因子(EGF)、200ng/ml生长分化因子-9(GDF-9)、10-5mol/L雌二醇(E2)、10-5mol/L孕酮(P4)的Waymouth培养体系中培养,以单纯Waymouth培养体系培养的大鼠卵巢为空白对照,培养8d后,石蜡包埋切片,HE染色,观察各级卵泡形态,并统计分析各级正常卵泡数,初步观察不同发育阶段和不同因子作用下的卵泡发育情况。(2)分别提取各组卵巢组织的总RNA,应用Illumina大鼠RatRef-12全基因组表达谱芯片研究各组卵巢组织基因表达的差异,探讨四大类原癌基因在原始卵泡正常启动生长过程中的变化,同时分析EGF、GDF-9、E2、P4在调控原始卵泡启动生长中的作用与四大类原癌基因的关系。结果:(1)经组织形态学的比较、各级正常卵泡数量的计算,观察到与单纯Waymouth培养体系培养的大鼠卵巢相比较,在Waymouth培养体系中分别加入50ng/ml EGF和200ng/ml GDF-9,均能进一步促进原始卵泡的启动生长,而在Waymouth培养体系中分别加入10-5mol/L E2和10-5mol/L P4,均会抑制原始卵泡的启动生长。(2)芯片结果显示:与新生组比较,8d空白对照组有3540个基因表达发生变化,其中上调的有1638个(Diffscore值>+20),包含了7个原癌基因A2m,Egfr, Fgf7, Fgr, Myc, Neu1, Thrb,下调的有1902个(Diffscore值<-20),包含了5个原癌基因Braf, Kit, Mycl1, Ntrk3, Reln。与空白对照组比较,EGF组有88个基因表达上调,其中包含1个原癌基因A2m,79个基因表达下调,其中包含1个原癌基因Mycn;GDF-9组和P4组,虽然分别有178个和121个基因发生了表达变化,但是均未发现表达差异的原癌基因;E2组有108个基因上调,127个基因下调,其中包含1个表达下调的原癌基因Mycn。结论:(1)在原始卵泡正常的启动生长过程中,一部分原癌基因参与了该过程的调控,如:A2m,Egfr,Fgf7,Myc,Reln,Kit。(2)EGF对于原始卵泡启动生长的促进作用可能与原癌基因A2m的表达上调有关。GDF-9、E2、P4对于原始卵泡启动生长的调控作用,可能不是由原癌基因介导的。