肝纤维化（hepatic fibrosis）是各种致病因素长期慢性刺激肝脏引起的炎症而形成的肝损伤，在组织修复过程中导致肝脏细胞外基质(extracellular matrixc，ECM)过量沉积，是肝硬化的早期阶段，若不及时治疗，会发展为肝硬化甚至是肝癌，严重的危害着人类的健康，因此寻找一种有效、低毒的抗纤维化的药物则具有重要的意义。黄癸固体分散体（BSC）是一种新型药物传递体，是将黄连素和癸酸钠组装而形成的，其能够解决黄连素的水溶性低以及肠粘膜通透性差所导致的生物利用度低等问题。有实验报道并且证实，黄连素具有保肝以及抗纤维化等药理作用[1]，因其生物利用度低，要达到治疗作用，就要增加药物剂量，导致其毒副作用大。因此研究黄癸固体分散体的保肝作用及机制对开发新的保肝药物具有重要的意义。研究显示氧化应激与肝纤维化的发生密切相关。当肝损伤时，在细胞因子的作用下，激活还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（NADPH oxidase，NOX），NOX家族又是活性氧（Reactive oxygen species，ROS）的主要来源。ROS在肝纤维化的发生发展过程中起着重要的作用。首先，ROS能够促进肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）的激活、增殖以及胶原合成，从而使促进肝纤维化的发生；其次ROS能够促进蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）激活，从而促进翻译起始因子的合成，促进使胶原生成增加；再次，在氧化应激中，ROS能够促进诱导HSC表达转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）[2]，TGF-β1能够介导HSC的分化以及胶原的生成。α-平滑肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）作为HSC激活的标志，在肝纤维化中表达也增加。因而ROS、NOX、TGF-β1、AKT、α-SMA在肝纤维化的发生发展中起着重要的作用，抑制这些因子的产生、激活可能成为保护肝脏的重要靶点。腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）作为一种能量感受酶，广泛存在于真核生物的细胞中，调节机体的能量代谢。最新研究发现AMPK也可以抑制NOX的激活，使ROS的生成减少，因此通过激活AMPK可以作为保肝或抑制肝纤维化发展的一种机制。目的：本实验研究黄癸固体分散体对肝纤维化的治疗作用，并探讨其抗纤维化作用与AMPK、NOX4、AKT、TGF-β1、α-SMA等蛋白的相关性。方法：本实验采用胆管结扎（bile duct ligation，BDL）的方法诱导大鼠肝纤维化模型，设置假手术组（Sham组）、肝纤维化模型组（Model组）、黄癸固体分散体高剂量、黄癸固体分散体低剂量组（BSC50mg/Kg、BSC25mg/Kg）、以及阳性对照水飞蓟宾组（Silybin组）。5周后处死大鼠，留取全血检测谷丙转氨酶（alanine transarninase，ALT）、谷草转氨酶（glutamic-oxal(o)acetic transaminase，AST）、碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，AKP）、总胆汁酸（TBA）、透明质酸（hyaluronic acid，HA）、层粘连蛋白（laminin，LN）、III型胶原蛋白前体（Procollagen-III，PIIINP）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）等指标。留取肝组织行HE染色、Masson染色，免疫组织化学方法检测TGF-β1的表达。Western Blot方法检测TGF-β1、NOX4、AKT、α-SMA、AMPK的蛋白表达水平。结果：1．黄癸固体分散体对胆管结扎诱导的大鼠肝纤维化具有治疗作用：黄癸固体分散体可以明显降低大鼠血清中ALT、AST、AKP水平，能够降低血清中TBA的水平，能够降低血清中HA、LN、PIIINP的水平，能够升高大鼠血清中SOD的水平、降低MDA的水平。HE、Masson染色显示黄癸固体分散体明显的改善BDL大鼠的病理组织学改变。2．黄癸固体分散体对相关蛋白表达的影响：黄癸固体分散体抑制了大鼠肝组织中TGF-β1、NOX4、AKT、α-SMA蛋白的表达，增加p-AMPK的表达。结论：本实验表明，黄癸固体分散体对肝纤维化具有明显的治疗作用。黄癸固体分散体的保肝作用可能与提高机体抗氧化能力，增加p-AMPK的表达，抑制NOX，减少胞内ROS的水平，减少TGFβ-1的表达有关。