Caspase-1/IL-1β轴与炎症性肠病肠功能紊乱的关系

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目的:研究半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1/白细胞介素-1β(Caspase-1/IL-1β)轴在炎症性肠病中与肠道功能紊乱的关系。方法:以正常、急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌(chronic colitis-associated cancer,CAC)小鼠离体结肠为研究对象,以乙酰胆碱为工具药,利用生物信号采集处理系统研究在不同生理及病理状态下,小鼠离体结肠收缩性的变化;利用免疫组织化学法、ELISA法和Western blot检测Caspase-1和IL-1β在正常、急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌小鼠肠组织和血浆中的表达量。结果:1.正常、急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌小鼠一般情况。正常小鼠精神状态活跃,毛色光滑,饮食正常,体重呈持续性增加,大便正常。急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌小鼠精神状态、毛色及饮食状况均较正常小鼠差,体重也均低于正常小鼠体重,且大便性状改变,并出现大便隐血。HE染色可观察到不同病理状态下结肠典型组织学特征。2.IL-1β在小鼠血浆中的表达水平。ELISA法检测显示:急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌小鼠血浆IL-1β水平高于正常小鼠血浆IL-1β水平,正常、急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌小鼠血浆IL-1β分别为:32.631±12.564 pg/ml、103.609±7.639 pg/ml、89.762±7.542 pg/ml、60.859±8.005 pg/ml,且差异有统计学意义(P<0.05)。3.小鼠离体肠管收缩性。在没有物理或化学刺激的环境中,急性肠炎、慢性肠炎及癌旁小鼠离体肠管的收缩振幅均低于正常小鼠,慢性肠炎相关肠癌小鼠离体肠管收缩振幅高于正常小鼠,正常、急性肠炎、慢性肠炎、慢性肠炎相关肠癌及癌旁小鼠肠管收缩振幅分别为:0.181±0.012 g、0.161±0.007 g、0.161±0.008g、0.219±0.033 g、0.149±0.006 g。且差异有统计学意义(P<0.05);在给予1μM乙酰胆碱刺激后,急性肠炎、慢性肠炎、慢性肠炎相关肠癌及癌旁小鼠离体肠管的收缩振幅高于正常小鼠,正常、急性肠炎、慢性肠炎、慢性肠炎相关肠癌及癌旁小鼠肠管收缩振幅分别为:0.196±0.057 g、0.369±0.037 g、0.391±0.091 g、0.431±0.052 g、0.348±0.046 g。且差异有统计学意义(P<0.05)。4.Caspase-1在小鼠肠道组织中的表达水平。免疫组织化学染色显示:在急性肠炎和慢性肠炎的黏膜及肌层中,Caspase-1的表达水平高于正常组织;在慢性肠炎相关肠癌的黏膜中,Caspase-1的表达水平低于正常组织,但在肌层中Caspase-1的表达水平高于正常组织。正常、急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌黏膜中Caspase-1的表达水平分别为:0.195±0.01、0.287±0.01、0.221±0.01、0.178±0.01,且差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示:Caspase-1在急性肠炎和慢性肠炎组织中的表达水平高于正常黏膜组织,Caspase-1在慢性肠炎相关肠癌组织中的表达水平低于正常黏膜组织。正常、急性肠炎、慢性肠炎及慢性肠炎相关肠癌黏膜组织中Caspase-1的表达量分别为:0.942±0.199、1.831±0.641、2.077±0.817、0.665±0.155,且差异有统计学意义(P<0.05);Caspase-1在急性肠炎、慢性肠炎、慢性肠炎相关肠癌及癌旁肌层的表达水平高于正常组织。正常、急性肠炎、慢性肠炎、慢性肠炎相关肠癌及癌旁肌层组织中Caspase-1的表达量分别为:0.806±0.061、1.209±0.056、1.082±0.048、0.962±0.093、0.908±0.073,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.肠道炎症通过Caspase-1/IL-1β轴导致肠蠕动功能紊乱,增强对刺激的敏感性。2.Caspase-1及IL-1β水平可作为评估肠道炎症的生物标志。
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