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目的:1.观察ox-LDL(Oxidized low density lipoprotein,氧化低密度脂蛋白)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)mi R-33(micro RNA-33,微小RNA-33)与NF-κB(Nuclear transcription factorκB,核转录因子κB)P65表达的影响;2.探究mi R-33抑制物(mi R-33 inhibitor)对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞炎症反应的作用机制,揭示mi R-33对血管内皮细胞炎症反应的调控作用,进一步阐明mi R-33在动脉粥样硬化发病中的作用。方法:实验第一部分:培养HUVEC,分别以50μg/mL,100μg/m L和200μg/m L的ox-LDL处理HUVEC,24小时后,q PCR检测mi R-33表达水平差异;Western Blot检测NF-κBP65表达水平。实验第二部分:培养人脐静脉内皮细胞,分组:(1)Normal(2)100μg/m L ox-LDL(3)100μg/m L ox-LDL+NC(negative control,阴性对照)(4)100μg/m L ox-LDL+mi R-33 inhibitor,向(3)组细胞中转染5pmol NC,(4)组转染5pmol mi R-33 inhibitor,6小时后予100μg/m L的ox-LDL处理(2)(3)(4)内皮细胞,24小时后进行如下检测:ELISA检测培养环境中炎性因子TNF-α(Tumor Necrosis Factorα,肿瘤坏死因子-α)和IL-6(Interleukin 6,白细胞介素-6),Western Blot检测NF-κBP65表达,q PCR检测细胞中mi R-33表达水平。结果:1.50μg/mL(p<0.05)、100μg/mL(p<0.01)和200μg/mL(p<0.01)浓度的ox-LDL刺激均能使人脐静脉内皮细胞中mi R-33表达较空白对照组上调,且随着ox-LDL浓度增加,mi R-33与NF-κBP65的表达逐渐增加。2.在经ox-LDL刺激后的人脐静脉内皮细胞中mi R-33的抑制剂组较NC组促炎性细胞因子TNF-α、IL-6的表达明显受到抑制(p<0.01)、mi R-33的表达显著下调(p<0.01)、NF-κBP65浓度降低。结论:1.ox-LDL上调人脐静脉内皮细胞mi R-33与NF-κBP65的表达,且这种表达的上调呈现出对ox-LDL浓度依赖的特性。2.mi R-33抑制剂可能通过下调人脐静脉内皮细胞NF-κBP65的表达,减少炎症因子的分泌,从而减轻炎症反应。