【摘 要】
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萜类物质是茶树生长代谢过程中不可或缺的化合物,也是影响茶叶品质的关键成分。本实验通过研究镉对萜类物质MEP合成途径相关酶基因（DXS和DXR）表达量和中间体DXP和MEP含量的影响,来探讨其影响茶树萜类物质合成的内在机理。具体研究成果如下:（1）梯度（0,0.5,2.5,5,10,15mg/L）镉溶液培养茶树,随着镉浓度增加,根部、茎部及叶部的镉含量均出现显著性上升。当培养液镉浓度为15mg/L时
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萜类物质是茶树生长代谢过程中不可或缺的化合物,也是影响茶叶品质的关键成分。本实验通过研究镉对萜类物质MEP合成途径相关酶基因（DXS和DXR）表达量和中间体DXP和MEP含量的影响,来探讨其影响茶树萜类物质合成的内在机理。具体研究成果如下:（1）梯度（0,0.5,2.5,5,10,15mg/L）镉溶液培养茶树,随着镉浓度增加,根部、茎部及叶部的镉含量均出现显著性上升。当培养液镉浓度为15mg/L时,各组分累积量趋于饱和,其中根部的镉含量最大,达到了381.51mg/kg,大于茎部的22.8mg/kg,大于叶部的7.96mg/kg。（2）开发并优化了DXP及MEP的LC-MRM-MS测量方法,在BEH C18柱上,通过添加离子对试剂提高MEP与DXP的保留和分离度。从结果上来看,MEP检出限能达到0.003ug/ml,线性相关系数R~2能达到0.992;DXP检出限能达到0.005ug/ml,线性相关系数R~2能达到0.996,添加回收率为70.2-79.6%左右。方法灵敏度高,重现性好,稳定可靠,适合应用于茶叶样品代谢物MEP及DXP含量的检测。用上述方法检测不同浓度镉叶片中DXP及MEP的含量,发现随着镉浓度的增加,茶树叶片细胞中DXP与MEP的含量降低,萜类合成受到阻碍。（3）运用基因克隆技术,分离、纯化DXS和DXR基因,荧光定量发现,随着镉浓度提升,DXS和DXR基因在细胞内诱导表达活性降低,合成的相关催化酶（DXP和DXR）含量减少。
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