骨髓间充质干细胞、血小板凝胶和体外冲击波联合应用治疗骨不连

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目的:骨折常并发骨不连,导致严重的功能障碍,给家庭和社会带来巨大负担。本实验应用大鼠萎缩性骨不连模型,探讨骨髓间充质干细胞、血小板凝胶和体外冲击波联合应用对骨不连治疗的作用,确定骨不连治疗的最佳方案。方法:1.建造Wistar大鼠萎缩性骨不连模型125只,随机分为骨不连组、骨髓间充质干细胞治疗组、骨髓间充质干细胞联合血小板凝胶治疗组、骨髓间充质干细胞联合体外冲击波治疗组、骨髓间充质干细胞联合血小板凝胶和体外冲击波治疗组,每组25只。2.全骨髓法得到大鼠骨髓间充质干细胞,并行体外培养、传代。3.抽取同种异体大鼠心脏血液,制备富血小板血浆。4.骨髓间充质干细胞、富血小板血浆在X线透视下移植入骨折端。5.相应组实验动物骨折端接受冲击波。6.每组给予相应的治疗。于术后第4周和第8周,对所有实验动物行X线检查,对骨折愈合情况进行评估,计算每组的骨折愈合率。7.术后第4周和第8周,每组随机选取5只实验动物行micro-CT检查,观察骨折愈合情况,分析成骨指标。8.术后第8周,每组抽取5只实验动物,骨折端行HE染色,观察骨折端骨组织生长情况并对新骨面积、成骨细胞数量和血管数量进行定量分析。结果:1.术后第4周和8周,X线检查结果显示骨不连组、骨髓间充质干细胞治疗组、骨髓间充质干细胞联合血小板凝胶治疗组、骨髓间充质干细胞联合体外冲击波治疗组、骨髓间充质干细胞联合血小板凝胶和体外冲击波治疗组骨折愈合率分别为0,20%,36%,40%,80%。骨髓间充质干细胞联合血小板凝胶和体外冲击波组骨折愈合率明显高于其他各组。2.术后第4周和8周,micro-CT结果显示骨髓间充质干细胞联合血小板凝胶和体外冲击波组的正向成骨指标:骨体积分数、骨小梁厚度和骨小梁数量均高于其他各组,负向成骨指标:骨小梁间隙和骨表面积与体积之比均低于其他各组。3.术后第8周,组织形态学结果显示骨髓间充质干细胞联合血小板凝胶和体外冲击波组成骨细胞数量、血管数量和新骨面积分数均高于其他各组。结论:1.骨髓间充质干细胞、血小板凝胶和体外冲击波在骨不连治疗上具有协同作用;2.骨髓间充质干细胞、血小板凝胶和体外冲击波联合应用为治疗骨不连的最佳方案。
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