【摘 要】
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随着纳米生物技术的飞跃发展,以纳米颗粒为基础的非病毒载体系统的出现,为实现安全高效的DNA转染提供了更好的工具。其中无机纳米颗粒载体通过表面恰当修饰可以克服机体各种
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随着纳米生物技术的飞跃发展,以纳米颗粒为基础的非病毒载体系统的出现,为实现安全高效的DNA转染提供了更好的工具。其中无机纳米颗粒载体通过表面恰当修饰可以克服机体各种屏障,靶向传递药物或质粒DNA,使其成为新型基因载体的研究热点。硅是一种生物相容性好,低毒,表面易于修饰,适合用于纳米基因载体的材料。目的:制备多聚赖氨酸-硅纳米基因载体,并初步研究其转染效果。方法:第一部分选用微乳体系为壬基酚聚氧乙烯醚/正己醇/环己烷/双蒸水,利用正硅酸乙酯在油包水型微乳体系中催化水解的方法制备硅纳米。并用多聚赖氨酸为修饰物,使多聚赖氨酸通过静电作用结合于硅纳米表面,获得基因载体-多聚赖氨酸-硅纳米。第二部分,通过琼脂糖凝胶电泳,研究多聚赖氨酸-硅纳米有效结合DNA的合适质量比。第三部分,将多聚赖氨酸-硅纳米与绿色荧光蛋白质粒(pEGFP -C1)结合在一起,体外转染HepG2与L02,在倒置荧光显微镜下观察转染效率。结果:制备了稳定的油包水型微乳体系,并用该微乳液体系制备出大小均匀,粒径30纳米,稳定性能好,分散性好的硅纳米。以多聚赖氨酸修饰硅纳米后,其与质粒pEGFP-C1结合的合适质量比为30:1。其转染HepG2与L02的效率分别为35.1%与34.0%,与质脂体转染组效率相当(P>5%)。结论:制备了多聚赖氨酸-硅纳米,该纳米颗粒可作为基因载体,有效转染质粒pEGFP -C1。
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