本实验是研究野西瓜硒多糖对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及凋亡作用,并探讨了其作用途径和作用机制。实验采用MTT法检测野西瓜硒多糖对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒作用。通过倒置显微镜和荧光显微镜观察野西瓜硒多糖对MCF-7细胞的形态学变化。通过流式细胞仪PI单染测凋亡率检测野西瓜硒多糖不同浓度对MCF-7细胞的凋亡率。激光共聚焦显微镜(CLSM)检测野西瓜硒多糖作用于MCF-7细胞后细胞中Ca2+浓度的变化;激光共聚焦显微镜(CLSM)检测野西瓜硒多糖作用于MCF-7细胞后细胞线粒体膜电位的变化;激光共聚焦显微镜(CLSM)检测野西瓜硒多糖作用于MCF-7细胞后活性氧(ROS)浓度的变化。实验结果表明,MTT法显示野西瓜硒多糖对人乳腺癌MCF-7细胞具有细胞毒作用。野西瓜硒多糖作用人乳腺癌MCF-7细胞48h后,倒置显微镜下观察阴性对照组MCF-7细胞贴壁生长,态势良好,MCF-7细胞维持原状,细胞膜未破裂,整合性强度高。阳性对照组细胞表面起皱大部分细胞破碎,细胞形态不完整。野西瓜硒多糖各组随给药剂量的增加,细胞间密度稀疏、松散、体积变小、起皱变形等现象。Hoechst3258荧光染色观察MCF-7细胞形态,阴性组细胞染色质均匀,完好,无破裂起皱。野西瓜硒多糖各组随给药浓度增加凋亡小体的数量也增加,细胞生长密度逐渐变疏,表面起皱,部分细胞破碎,细胞形态不完整。PI染色流式细胞仪检测野西瓜硒多糖作用MCF-7细胞48h后,肿瘤细胞的凋亡峰出现,随着剂量增加肿瘤细胞的细胞凋亡率也随之增加。激光共聚焦扫描显微镜检测野西瓜硒多糖对MCF-7细胞Ca2+浓度的影响的实验结果表明,通过野西瓜硒多糖剂量的增加,细胞内Ca2+浓度升高值也相应增加;对膜电位的变化表明,随着给药浓度的升高而下降;活性氧(ROS)研究表明,随着野西瓜硒多糖剂量的增加,细胞内活性氧含量升高,与对照组差异显著。该研究表明,野西瓜硒多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的过程中,细胞中活性氧水平、Ca2+浓度以及线粒体跨膜电位都起到了非常关键的作用。其先提高细胞内ROS含量,ROS过多可以使线粒体膜受到损伤,导致线粒体内Ca2+外流,升高了细胞内的Ca2+浓度,从而引起凋亡因子的释放,引发细胞凋亡。综上所述,野西瓜的硒多糖能抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并具有诱使MCF-7细胞凋亡的能力。