木麻黄（Casuarina）是优良的沿海防护林树种。其中Casuarina equisetifolia（属于短枝木麻黄的一种）的基因组最近测序完成,使得木麻黄具有了成为耐盐模式树种的潜力,也亟需开发其转基因体系为分子研究服务。然而现有的转基因体系仅限于轮生木麻黄、细枝木麻黄、粗枝木麻黄,且其方法均不适用于Casuarina equisetifolia。本研究使用测序木麻黄（Casuarina equisetifolia）的幼嫩枝条为研究材料,建立了快速、高效的愈伤组织再生体系,并在此基础上初步确立了农杆菌介导的木麻黄遗传转化条件。同时,我们对CRISPR/Cas9系统sgRNA序列单碱基错配进行了分析,为将来敲除测序木麻黄基因时sgRNA的设计提供了理论依据。主要研究结果如下:1、木麻黄幼嫩枝条愈伤组织再生体系:（1）两步法暗培养诱导愈伤组织,首先在1/2MS基础培养基中添加0.1 mg·L^-1NAA和0.1 mg·L^-1 TDZ诱导愈伤组织产生,愈伤组织诱导率为99.33%;再在1/2MS基础培养基中添加0.5 mg·L^-1 6-BA和0.1 mg·L^-1 TDZ增殖愈伤组织10-15 d,愈伤组织增殖率为100%;（2）在1/2MS基础培养基中添加0.5 mg·L^-1 6-BA、光照培养,诱导增殖后的愈伤组织产生不定芽,待不定芽伸长至1 cm左右时进行生根;（3）在1/2MS基础培养基中添加0.04 mg·L^-1 IAA和0.02 mg·L^-1 IBA、光照培养,诱导不定芽生根,生根率为83.25%。2、木麻黄农杆菌介导的遗传转化:以木麻黄的幼嫩枝条为受体材料,使用不同的农杆菌菌株将gus基因转入受体中,对共培养时间、乙酰丁香酮的使用浓度、受体对潮霉素和卡那霉素的敏感性进行了试验,主要结果如下:（1）使用C58C1为转化菌株,共培养两天转化效率较高;（2）在潮霉素抗性筛选体系中,使用20 mg·L^-1 As和5 mg·L^-1 Hyg进行转化筛选,经过gus基因组织染色发现,抗性愈伤组织诱导率可达80%,抗性不芽诱导率可达91.3%;（3）在卡那霉素抗性筛选体系中,初步确定15 mg·L^-1 As和60 mg·L^-1 Kan进行转化筛选,可获到较高的抗性愈伤组织诱导率,为76.58%。3、CRISPR/Cas9系统基因敲除的sgRNA保守区分析:CRISPR/Cas9在20个碱基（从PAM的远端开始计算）上不匹配仍然可能导致水稻基因的高频编辑。