单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种重要的食源性致病菌,在自然界广泛分布,可以污染食品引起食物中毒,引起人类李斯特菌病,致死率可高达30%。Lm在食品加工环境中可以粘附在不同材料上形成菌膜。菌膜状态下Lm对消毒剂的抗性更强,从而成为食品加工环境的潜在污染源,加大了食品安全风险。本研究旨在通过MLST分型和毒力基因分布调查对上海市食源性Lm进行群体多样性分析,同时比较不同菌株的菌膜形成能力差异,具体结果如下:1、对86株上海市食品来源的Lm进行了多位点序列分型,结果显示,血清型和ST型具有对应关系,86株菌株被分为15个ST型(sequence type),含有2个复合克隆系(clone complex,CC)—CC7和CC155。其中,ST8、ST155、ST87、ST121是近些年上海市食源性Lm的流行ST型。不同来源的Lm的ST型分布不同,ST87和ST121菌株分布最广,在4类食品中(生肉、熟肉、水产品、速冻食品)分离得到。2、对86株食源性Lm进行了12个毒力基因(毒力岛1的prfA、plcA、hly、mpl、actA、plcB和毒力岛2的inlA、inlB、inlC、inlJ以及毒力相关基因iap、clpE的检测和李斯特菌溶血素S(Listeriolysin S,LLS)阳性菌株、流行性克隆(epidemic clone,EC)菌株的调查,结果显示86株Lm对12个毒力基因的携带率为100%,LLS阳性菌株有4株,ECIII菌株有16株,说明了上海市食源性Lm可能具有潜在的致病性。3、利用96孔板结晶紫染色法对86株Lm进行了菌膜形成能力分析,结果,Lineage I菌株(17/86)平均菌膜形成量要高于Lineage II菌株(69/86),差异不显著(P>0.05)。用含氯消毒剂XY-12对不同状态下的Lm进行处理,发现菌膜状态下的Lm比浮游状态的Lm抗性强。针对与Lm抗逆相关的5个基因(sigB、fri、kat、perR、recA),利用RT-qPCR技术,探讨了不同状态下菌株经含氯消毒剂处理时的基因表达差异,结果显示浮游状态下Lm的sigB和fri基因上调,提示我们这2个基因在浮游Lm的抗逆过程中起到了重要作用,而这5个基因对菌膜状态下Lm的抗逆作用并不显著。综上,本研究发现了上海市食源性Lm的流行ST型和流行性克隆菌株,为流行病学调查提供了数据支撑。同时发现了不同状态下Lm对含氯消毒剂的抗性差异和相关抗逆基因的表达差异,为进一步研究Lm菌膜对含氯消毒剂的抗性分子机制奠定了基础。