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目的:近来研究发现,生物钟基因与炎症联系紧密,而炎症免疫反应在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)发生发展过程中发挥重要作用,基于此,本研究拟通过检测AMI患者生物钟核心基因Clock、Bmal1蛋白的不同时间点表达水平,并分析其与血清炎性因子的相关性,以从蛋白水平上探讨生物钟基因在AMI发生、发展中的作用。方法:(1)入选AMI患者46例,作为研究组;稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)患者37例,作为对照组。不同时间点(06:00、18:00)收集患者外周动脉血单核细胞,采用Western Blot检测两组患者Clock、Bmal1蛋白表达水平。另外,收集两组患者静脉血清,通过ELISA检测两组患者血清IL-6、TNF-α及MMP-2、MMP-9浓度。比较两组患者不同时间点Clock、Bmal1蛋白表达水平及血清IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9浓度,并分析两组患者Clock、Bmal1蛋白水平与血清炎性因子IL-6、TNF-α的相关性。(2)入选行急诊PCI术的急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者81例,根据胸痛发作时间分为四组:Period1:(0:00-05:59)(14例)、Period 2:(06:00-11:59)(28例)、Period 3:(12:00-17:59)(23例)、Period 4:(18:00-23:59)(16例)。入院即刻收集患者外周动脉血单核细胞及静脉血清,采用Western Blot检测单核细胞Clock、Bmal1蛋白表达情况,通过ELISA检测血清IL-6、TNF-α浓度。另外,检测四组患者肌酸激酶(creatine kinase,CK)峰值、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme-MB,CK-MB)峰值水平。比较四组患者Clock、Bmal1蛋白水平、血清IL-6、TNF-α浓度以及CK峰值、CK-MB峰值,并分析STEMI患者生物钟蛋白与血清炎性因子的相关性。结果:(1)与SAP患者相比,AMI患者Clock、Bmal1蛋白表达水平显著降低,且两组患者Bmal1蛋白在06:00表达量均少于18:00表达量(P<0.05),而两组患者Clock蛋白在不同时间点表达量未见统计学差异(P>0.05)。与SAP患者相比,AMI患者血清IL-6、TNF-α及MMP-2、MMP-9表达水平均明显升高(P<0.05)。两组患者Bmal1蛋白表达水平与血清炎性因子IL-6、TNF-α浓度均呈明显负相关(均P<0.0001,相关系数分别为r=-0.672、r=-0.513),Clock蛋白水平与血清炎性因子IL-6、TNF-α浓度未见相关性(P>0.05)。(2)与其他时间发病的STEMI患者相比,时间段Period 2(06:00-11:59)发病的患者血清炎性因子TNF-α浓度最高,CK峰值及CK-MB峰值最高,且Bmal1蛋白表达量最低(P<0.05)。与Period 1及Period 4发病的患者相比,Period 2的患者血清炎性因子IL-6浓度较高(P<0.05),而与Period 3的患者相比,虽然IL-6浓度也较高,但差异没有统计学意义(P>0.05)。不同昼夜时间发病的STEMI患者Clock蛋白表达量未见统计学差异(P>0.05)。STEMI患者Bmal1蛋白表达水平与血清炎性因子IL-6、TNF-α浓度均呈明显负相关(均P<0.0001,相关系数分别为r=-0.602、r=-0.527)。结论:(1)急性心肌梗死患者生物钟Clock、Bmal1蛋白在不同时间点表达均低于稳定型心绞痛患者,且两组患者Bmal1蛋白均呈现出生物节律变化趋势。(2)Bmal1蛋白表达降低可能造成稳定型心绞痛患者机体炎症反应增强,促进粥样斑块稳定性降低或破裂,从而造成心肌梗死的发生,且Bmal1蛋白可能在心肌梗死发生的时间节律性上发挥重要作用。(3)Bmal1蛋白表达降低可能加重心梗后心肌损伤程度。这些发现可能为防治心肌梗死提供一个新的思路。