【摘 要】
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目的探讨人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)基因沉默对人卵巢癌细胞株A2780凋亡的影响。方法构建针对NGAL基因的si RNA真核表达载体,转染入A2780细胞中,实验分为3组:空白对照组(Control)、转染NGAL-si RNA沉默组(NGAL-si RNA)和转染阴性对照组(NC-NGAL)。
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目的探讨人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)基因沉默对人卵巢癌细胞株A2780凋亡的影响。方法构建针对NGAL基因的si RNA真核表达载体,转染入A2780细胞中,实验分为3组:空白对照组(Control)、转染NGAL-si RNA沉默组(NGAL-si RNA)和转染阴性对照组(NC-NGAL)。免疫荧光检测NGAL在A2780细胞及IOSE80正常卵巢细胞的表达情况,通过RNA技术沉默NGAL后,运用q RT-PCR及Western blot检测沉默NGAL基因效率。CCK-8法检测细胞活力,TUNEL染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测NF-κB、Caspase-3蛋白表达。结果NGAL在A2780细胞呈高水平表达。NGAL-si RNA组NGAL基因及蛋白水平表达都受到明显的抑制(P<0.01)。与Control组相比,NGAL-si RNA组细胞凋亡率及Caspase-3蛋白表达明显增加,细胞活力及NF-κB蛋白表达明显下降(P<0.01),而NC-NGAL组各项指标与Control组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默人卵巢癌细胞株A2780中NGAL基因的表达,可抑制细胞的生长,并促进细胞的凋亡,其机制与上调Caspase-3蛋白表达,下调NF-κB蛋白表达有关。
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