【摘 要】
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目的:以肺癌A549细胞作为研究对象,探讨半枝莲提取物对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及与内质网应激之间的关系。方法:采用体外培养的肺癌A549细胞进行实验。1、观察不同浓度
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目的:以肺癌A549细胞作为研究对象,探讨半枝莲提取物对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及与内质网应激之间的关系。方法:采用体外培养的肺癌A549细胞进行实验。1、观察不同浓度半枝莲提取物对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响:将实验分为4组,A组:阴性对照组、B组:半枝莲提取物10mg/L、C组:半枝莲提取物20mg/L、D组:半枝莲提取物40mg/L,各组分别处理不同时间(24、48、72 h)后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞的凋亡情况,Western blot检测各组内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白(GRP78/Bip)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)蛋白的表达情况。2、探讨半枝莲提取物对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响与内质网应激的关系:将实验分为3组,A组:阴性对照组、B组:半枝莲提取物最佳浓度(SBE40mg/L)组、C组:半枝莲提取物最佳浓度(SBE40mg/L)+4-PBA抑制剂组;分别处理不同时间(24、48、72 h)后,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测各组GRP78/Bip、CHOP和Caspase-12蛋白的表达。结果:1、不同浓度半枝莲提取物对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响:(1)与阴性对照组相比,给予不同浓度(10mg/L、20mg/L、40mg/L)半枝莲提取物分别处理肺癌A549细胞24~72 h均可显著抑制其增殖,且具有时间剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与阴性对照组相比,不同浓度(10mg/L、20mg/L、40mg/L)半枝莲提取物处理肺癌A549细胞48小时后,凋亡率均明显高于未给予半枝莲提取物处理的阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与阴性对照组相比,半枝莲提取物组GRP78/Bip、CHOP和Caspase-12的表达均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。2、探讨半枝莲提取物对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响与内质网应激之间的关系:加入ERS抑制剂(4-PBA)后,较未加入4-PBA组,肺癌A549细胞的增殖抑制率明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);凋亡率明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);GRP78/Bip、CHOP和Caspase-12蛋白的表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1、半枝莲提取物具有抑制肺癌A549细胞增殖及促进细胞凋亡的作用。2、半枝莲提取物可能通过内质网应激途径抑制肺癌A549细胞的增殖并促进其凋亡。
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