梨是我国主要水果之一,种质资源十分丰富,其中红皮梨因其色泽鲜艳而受到广大消费者的喜爱,市场前景广阔。红皮梨的着色主要是果皮中花青苷合成与积累的结果,国内外对于梨花青苷合成相关基因的研究相比较其他植物起步较晚,因此关于红梨着色机理的研究还有待进一步深入。前期,课题组在从‘奥冠’果皮中分离基因PyMYB10时,得到另一花青苷调控MYB基因Py MYB10.1,本研究进一步鉴定了PyMYB10.1的基因功能。主要研究结果如下:1、PyMYB10.1序列分析,基因开放读码框共714 bp,编码237个氨基酸,蛋白分子量27.4 kD,等电点8.78。2、氨基酸序列比对分析结果显示,在序列N端具有保守的R2R3-MYB结构域,而且R3-MYB结构域中含有bHLH结合基序,与大多数花青苷调控MYB转录因子的结构相似。3、将氨基酸序列提交到NCBI上,Blast同源比对结果显示,PyMYB10.1与植物中调控花青苷合成的MYB10类转录因子同源性很高,其中与苹果MdMYB10的一致性为49%,与梨PyMYB10的一致性为51%。4、进化树分析结果显示,PyMYB10.1与苹果中MdMYB10、梨中PyMYB10、草莓中FaMYB10等促进花青苷合成的MYB转录因子亲源关系较近;而与FaMYB1、MdMYB17等抑制花青苷合成的MYB转录因子以及调控原花青素的MdMYB9、VvMYBPA2,调控黄酮醇类的AtMYB12、VvMYBF1等亲缘关系较远。5、基因表达分析结果表明,Py MYB10.1在富含花青苷的梨幼叶、花、果皮中表达量明显高于果肉,果皮中的表达量与花青苷调控基因PyMYB10相比,无显著差异;遮光及MeJA处理后果皮中PyMYB10.1、PyMYB10的基因表达量与花青苷含量变化趋势一致。6、酵母双杂交、双分子荧光互补以及烟草瞬时表达分析结果表明,PyMYB10.1和PyMYB10可以单独或者与bHLHs互作共同调控花青苷合成结构基因AtDFR启动子的表达;在bHLHs存在时,明显增强了PyMYB10.1和PyMYB10对AtDFR启动子的调控效应,促进花青苷的积累。由以上结果可知,PyMYB10.1是PyMYB10的同源基因,可以响应光照与MeJA信号,是花青苷合成过程中重要的正向调控因子;PyMYB10.1和PyMYB10可以通过与bHLHs互作共同激活花青苷结构基因的表达,进而促进花青苷合成。