目的:观察高原急性缺氧Wistar大鼠动物模型予以自噬抑制剂3-MA干预后,肠黏膜上皮损伤的组织形态后的变化、紧密结合蛋白occludin、occludin mRNA的表达、自噬功能状态Beclin1、Beclin1 mRNA、LC3、LC3mRNA的表达,探讨急性高原缺氧条件下,自噬是否对肠粘膜屏障功能有保护效应。方法:以24只体重约(200±20)g,7-8周龄健康雄性Wistar大鼠作为研究对象,随机分为对照组、高原缺氧组、高原缺氧3-MA组,在模拟高原低压氧舱中低压氧环境下建立急进高原缺氧大鼠模型。根据前期及预实验筛选出3-甲基腺嘌呤的最佳作用浓度(3mg/kg)及自噬最佳作用的海拔高度、时间(6000米,48h)。于进氧舱前30分钟给予高原缺氧3-MA组腹腔注射筛选浓度的3-MA(3mg/kg),对照组、高原缺氧组均给予腹腔注射等体积的生理盐水。比较各组48h前后大鼠的行为学改变,光镜下肠组织的病理改变(HE染色),Western blot方法检测紧密连接蛋白Occludin、自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)的表达,RT-PCR方法检测(LC3、Beclin-1、Occludin)mRNA的表达。结果:(1)在海拔6000m缺氧48h的急进高原缺氧大鼠模型肠黏膜HE染色结果分析:与对照组相比,高原缺氧组肠黏膜肿胀明显,毛细血管呈充血、淤血改变,绒毛排列紊乱,结构被破坏,可见倒伏、融合甚至断裂脱落。与高原缺氧组比,3-MA组肠组织损伤程度更为严重,肠管局部的黏膜层和黏膜下层出现分离现象,甚至出现固有层裸露及多种炎症细胞聚集。(2)RT-PCR分析,与对照组相比,高原缺氧组自噬相关基因LC3、Beclin-1 mRNA的表达增高(P<0.01),差异具有统计学意义;与高原缺氧组比,3-MA组肠粘膜组织中LC3、Beclin-1 mRNA表达均下降,两组间差异具有统计学意义(P<0.01)。且对照组,高原缺氧组及高原3-MA组肠黏膜组织Occludin mRNA表达逐渐下降(对照组>高原缺氧组>3-甲基腺嘌呤组),组间比P<0.01,差异具有统计学意义。(3)Western Blot分析,与对照组相比,高原组肠黏膜组织LC3、Beclin-1蛋白表达增高(P<0.01),差异具有统计学意义;与高原缺氧组比,3-MA组LC3、Beclin-1蛋白表达下降,两者差异显著(P<0.01),具有统计学意义;且三组中Occludin蛋白表达水平与Occludin mRNA表达趋势一致,各组间有显著统计差异(P<0.05)。结论:通过建立模拟急性高原缺氧动物模型,发现急性高原缺氧不仅对肠粘膜屏障有损害作用,而且自噬抑制剂3-MA还可下调肠粘膜上皮细胞相关的紧密连接蛋白Occludin的及自噬相关基因LC3、Beclin-1的表达,提示自噬在急进高原缺氧大鼠肠黏膜屏障功能损伤的过程中可能起到一定的保护作用。