猪繁殖与呼吸综合征（蓝耳病）(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的猪的一种高度接触性传染病，该病以母猪流产、死胎、弱胎、木乃伊胎以及仔猪呼吸困难、败血症、高死亡率等为主要特征。2006年春夏之交，我国中东部地区爆发猪的“无名高热病”，给养猪业造成了巨大的经济损失。经国家相关部门调查研究证实，其主要病原之一是猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株。猪细环病毒(Torque teno sus vires，TTSuVs)是新发现病毒，目前猪体内已发现了TTSuV1和TTSuV2两种病毒，广泛存在于家猪、野猪。我国各地猪病多发，混合感染严重，猪细环病毒也是可能的病原。本研究开展了PRRSV的分子流行病学调查，并研究了TTSuV1自然感染对PRRSV疫苗免疫的影响。　　 1、华东地区PRRSV分子流行病学调查　　 为了解华东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分子流行病学特征，运用RT-PCR方法对来自江苏、浙江、安徽、山东、上海、福建等6省市2006-2010年间的1509份临床发病猪和927份临床健康猪病料进行了PRRSV检测，并从每个省市PRRSV阳性样品中任选6株变异株和3株经典株进行了NSP2和ORF5的基因测序。结果发现：临床发病猪中变异株阳性样品984份(65.2％)，经典株阳性样品233份(15.4%)；临床健康猪中变异株阳性样品53份(5.7%)，经典株阳性样品65份(7．O%)。NSP2基因测序结果表明在中国部分地区存在2种不同NSP2基因型毒株（经典株和变异株）的广泛流行，但PRRSV变异株的氨基酸缺失位置和数目并不完全一致，氨基酸同源性为44.0%-100%。ORF5测序结果显示在各个PRRSV分离株内存在着大量氨基酸的点突变，氨基酸同源性为86.6%-100%。上述结果表明：我国猪群中PRRSV变异株和经典株同时广泛流行，但变异株占优势；临床健康猪群中也存在较多的PRRSV隐性感染；ORF5、NSP2基因变异现象普遍存在，不同地区PRRSV分离株的遗传关系存在交叉现象，地域特征不明显。　　 2、 PRRSV变异株和经典株感染仔猪的差异性分析　　 将猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株(VS-PRRSV)和经典株(CS-PRRSV)感染仔猪，对其致病性和血液学、免疫学的指标进行了比较。选择15头3周龄健康商品仔猪，随机平均分为3组。每组猪分别于颈部肌肉接种VS-PRRSV、CS-PRRSV和生理盐水，接种后隔离饲养观察7周。观察临床症状、病理组织学变化，检测抗体水平及免疫相关的指标．试验结果发现VS-PRRSV感染组猎体温急剧升高到41℃以上，临床症状更加严重，发病率100%，死亡率80%；肺脏间质性肺炎严重，肺泡膈增厚，巨噬细胞大量浸润；CD4和CD8 T淋巴细胞数下降更加迅速，恢复更为缓慢，CD4/CD8比值在10～21 dpi时显著低于阴性对照组和CS-PRRSV感染组；VS-PRRSV感染组猪出现持续35天的病毒血症，而CS-PRRSV感染组只有28天；抗-PRRSVN蛋白抗体产生提前了3天，而中和抗体产生推迟了7天；Th1和Th2之间动态平衡“漂移”次数增加1次；MHC-1、MHC-2及C3的mRNA水平在较长一段时间内被抑制；而CS-PRRSV感染组猪仅出现轻微临床症状和病理变化，免疫学指标变化相对比较缓和。结果表明：接种VS-PRRSV后产生更加严重的致病性，细胞免疫及体液免疫均被进一步抑制。　　 3、华东猪群中PRRSV与TTSuVs混合感染的检测　　 从江苏、安徽、浙江、山东、上海、江西6省市2006-2010年间不同猪群中收集临床有疑似PRRSV感染发病病死猪的组织样品1457份，以及临床健康猪的组织样品927份。用PCR方法检测各个样品中PRRSV和TTSuV1、TTSuV2。结果表明：1457份临床发病猪样品中，三种病毒的检出率分别为71.7%(PRRSV)、58.4%(TTSuV1)和48.0%(TTSuV2)，单重感染和阴性个体仅占23.5%和4.9%，且存在非常严重的双重感染(67.6%)和三重感染(11.4%)。927份临床健康猪的组织样品中，三种病毒的检出率分别为7.7%(PRRSV)、49.4%(TTSuV1)和55.7%(TTSuV2)，单重感染和阴性个体为37.3%和10.8%，双重感染和三重感染仅占7.1%和2.4%。PRRSV阳性样品中TTSuV1(65.3%)和TSuV2(49.8%)的感染率均较高，TTSuVs总感染率高达94.3%; PRRSV阴性样品中TTSuVl(47.2%)和ITSuV2(54.1%)的感染率也较高，TTSuVs总感染率仍高达86.4%。结果表明PRRSV、TTSuV1和TTSuV2在华东地区猪群中广泛分布，临床发病猪的PRRSV和TTSuVs的检出率明显高于临床健康猪，TTSuV1和（或）TTSuV2极有可能对PRRSV等病毒感染有协同作用。　　 4、 TTSuVI自然感染对PRRS活疫苗免疫效果的抑制作用　　 为研究猪细环病毒1型( TTSuV1)自然感染对蓝耳病活疫苗刺激机体产生抗体的影响，本实验从中国江苏两家猪场选择了4周龄的TTSuV1阳性猪15头和阴性猪20头。TTSuV1阳性猪平均分成三组，阴性猪平均分成四组。6周龄用蓝耳病活疫苗进行免疫，10周龄用强毒力PRRSV攻毒。同时设立TTSuV1阴性对照组和非免疫对照组。试验过程中，检测了PRRS MLV免疫后仔猪的免疫反应、细胞因子变化和保护性实验。结果显示：疫苗免疫实验中，TTSuV1阳性免疫组（D组）的PRRS病毒抗体、IFN-γ、IL-10水平和T淋巴细胞增殖能力全程低于TTSuV1阴性免疫组（B组），但仅在28dpi时D组抗体水平（S/P值：2.05）明显低于B组(S/P值：2.21，P