脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis viurs，EMCV)是RNA病毒科心病毒属的成员，可以引起仔猪脑炎、心肌炎以及母猪繁殖障碍为特征的传染病。本研究针对EMCV结构蛋白VP1基因设计了一对特异性的引物，采用RT-PCR方法扩增出831bp的完整VP1基因片段。将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)，构建了EMCVVP1基因重组表达质粒pET-32a-VP1。经酶切、测序鉴定正确后，将重组质粒转化BL21(DE3)株感受态细胞，用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE电泳分析结果显示VP1蛋白获得成功表达，融合蛋白的分子质量约为52ku，表达的重组蛋白以包涵体形式存在。经Western-blot试验，表明重组VP1蛋白与猪抗EMCV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应。　　 利用纯化的重组蛋白VP1作为包被抗原，建立了用于检测EMCV抗体的间接ELISA方法。经优化，获得间接ELISA的最佳条件：以pH9.6、浓度为0.05mol/L的碳酸盐缓冲液做包被液；抗原包被浓度为0.625ug/mL，室温作用2h后4℃包被过夜；待检血清稀释度为1:40，作用时间为60min；酶标二抗兔抗猪IgG-HRP工作浓度为1:6000，待检血清与酶标二抗作用条件为37℃30min；底物在室温避光条件显色时间为15min；血清样本阴阳性临界值为0.33。特异性试验表明重组VP1抗原与猪瘟、猪圆环病毒病、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪口蹄疫的阳性血清无交叉反应。　　 应用所建立的间接ELISA方法对广西地区2010年-2011年的2228份猪血清样品进行了EMCV抗体检测，结果，被检猪场的阳性率为100％，被检血清样品的阳性率为91.47％，其中仔猪的血清阳性率为43.14％，后备母猪的血清阳性率为84.7％,育成猪的血清阳性率为91.67％。表明广西地区猪群已经普遍感染EMCV。　　 结果表明，本研究成功表达了猪EMCV结构蛋白VP1，建立了基于VP1蛋白的间接ELISA方法，开展了广西地区猪群EMCV感染的血清学调查，为进一步研究EMCV的防控技术奠定了基础。