一、背景:抑郁症是一种高复发风险的神经精神疾病。新近大量研究发现,虽给予长期持续抗抑郁药物治疗但仍有大量抑郁症患者愈后复发,其发生机制尚不确定。神经可塑性变化是抑郁症病理发生发展的重要过程,若从该角度研究长期持续抗抑郁药物治疗对细胞支架微管可塑性的影响,能为我们认识抑郁症复发机制提供新的研究基础。二、目的:研究长期持续氟西汀给药下PC12细胞内CRMP2和Tubulin的m RNA和蛋白表达变化。进一步给予CRMP2激动剂或抑制剂调控其活性,观察CRMP2介导参与微管蛋白Tubulin支架微管可塑性变化,阐明长期持续氟西汀给药下细胞支架微管系统可塑性变化的可能机制。三、方法:培养PC12细胞,分为正常对照组（NC）和氟西汀(Flu,10-6mol/L)给药组,持续处理3天,CCK8分析细胞活性的变化。使用免疫荧光技术检测第1天、第2天和第3天两组间CRMP2和Tubulin的荧光表达,RT-PCR和Western Blotting检测第1天、第2天和第3天CRMP2和Tubulin的m RNA表达和蛋白含量,免疫共沉淀（Co-IP）技术检测两蛋白间的相互作用验证荧光共定位现象。最后给予CRMP2抑制剂SB216763组（SB,10μM）和激动剂Wortmannin组（WT,5μM）持续处理3天,运用上述实验方法分析持续作用3天CRMP2和Tubulin荧光、m RNA的表达和蛋白含量的变化。四、结果:1.NC组持续培养3天,细胞活性呈现下降趋势,第2天（93.5±3.5%）和第3天（71.4±4.4%）的细胞活性间存在统计学差异（P<0.000）。2.Flu组和NC组在第1天突起伸展明显,但Flu组第3天突起连接明显抑制。SB组第1天和第2天细胞突起伸展缓慢,细胞间连接稀疏,但第3天时细胞却形成类网络样的细胞连接。WT组连续处理3天,细胞突起增长旺盛,细胞连接紧密有序。3.Flu组第1天（1.31±0.08,P=0.030）和第2天（1.60±0.07,P=0.001）比NC组明显增加CRMP2的m RNA表达,但第3天（0.46±0.04,P=0.001）则出现下降。Flu组Tubulin的m RNA表达第1天（1.35±0.05,P=0.017）和第2天（1.63±0.05,P=0.001）比NC组增加,第3天（0.64±0.07,P=0.026）也出现下降。4.Flu组第1天（0.84±0.26,P=0.004）的CRMP2明显升高,第2天（0.67±0.23,P=0.266）则和NC组无统计学差异,第3天（0.23±0.11,P=0.026）蛋白含量甚至低于NC组。Flu组的Tubulin蛋白第1天（1.34±0.23,P=0.041）高于NC组,但第2天（0.73±0.29,P=0.123）第3天（0.21±0.09,P=0.015）Tubulin蛋白含量也与NC组无统计学差异。5.荧光结果显示CRMP2和Tubulin存在共定位现象,免疫共沉淀进一步验证CRMP2和Tubulin蛋白间存在相互作用。五、结论:1.氟西汀长期持续给药可引起细胞支架微管可塑性变化,在使用前期能够有效地改善支架微管可塑性,但给药后期却引起支架微管可塑性的损伤。2.CRMP2和Tubulin存在蛋白间相互作用,CRMP2介导氟西汀长期持续给药所致的细胞支架微管可塑性变化过程。