【摘 要】
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蕨类植物是世界上最古老的植物类群,不少种类具有良好的食用价值、药用价值、工业用途、生态指示作用和观赏价值。其中,桫椤属植物、卷柏属植物既有科学价值,又有很高的观赏价值,前者为稀有的树蕨类,姿态优美,富有热带风情,可做行道树、园景树,后者生境多样,既能适应潮湿的环境,又能适应干旱的环境,在园林上可灵活运用于不同的场地,丰富地被植物的种类。但由于生境破坏、过度采挖,桫椤属植物的现状不容乐观,而卷柏属植
【基金项目】
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上海市绿化和市容管理局科研项目(G182411)
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蕨类植物是世界上最古老的植物类群,不少种类具有良好的食用价值、药用价值、工业用途、生态指示作用和观赏价值。其中,桫椤属植物、卷柏属植物既有科学价值,又有很高的观赏价值,前者为稀有的树蕨类,姿态优美,富有热带风情,可做行道树、园景树,后者生境多样,既能适应潮湿的环境,又能适应干旱的环境,在园林上可灵活运用于不同的场地,丰富地被植物的种类。但由于生境破坏、过度采挖,桫椤属植物的现状不容乐观,而卷柏属植物虽然种类繁多,适生性强,但由于具有良好的抗肿痛活性物质,也遭遇大量采挖。因此,有必要展开对这两个属植物的繁殖技术研究,利用组织培养的方法构建快繁体系,一方面保护野生植物资源,另一方面促进野生植物资源在园林的利用。海南拥有丰富的桫椤属和卷柏属植物资源。对海南桫椤属、卷柏属植物展开快繁体系的研究,不仅有利于保护海南的野生植物资源,而且还能丰富海南的园林植物种类,提高海南的园林景观观赏性,增加热带城市园林和城市林业的景观特色和生物多样性。本文通过实地调查、文献分析,对桫椤属和卷柏属植物的园林应用可行性进行了分析。同时采用单因素实验、双因素交叉实验以及三因素三水平的正交实验设计,首次通过配子体诱导GGB途径,完成了阴生桫椤、大叶黑桫椤快繁体系的构建,筛选了二形卷柏孢子萌发最优的消毒方式、接种方式和培养基,主要结果如下:(1)以海口市为例,目前在城市园林上大规模应用的蕨类植物仅有1种,而且应用形式单一,园林景观缺乏地方特色,热带风情不明显。海南具有较丰富的桫椤属和卷柏属植物资源,主要集中在海南岛的中西部山区。桫椤属植物是树蕨类,富有热带风情,在园林上应用形式多样,既可作行道树,又可作园景树;卷柏属植物生境多样,既有耐旱种类,也有喜阴湿的种类,可适用于不同场地的园林配置。可见,桫椤属、卷柏属植物具有巨大的园林应用价值。(2)阴生桫椤快繁体系的构建:1/10MS是孢子萌发最优培养配方,萌发率高达62.33%;1/2MS+NAA 0.3 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,蔗糖30 g/L,琼脂6.5 g/L是诱导配子体产生GGB的最优培养配方,诱导率可达46.67%,增殖倍数可达3.67;KT 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L是其诱导GGB分化的最优配方,分化率为38.90%;孢子体幼苗在(泥炭土∶菜园土:珍珠岩=3:3:1)的基质中成活率最高,4周后最高成活率可达67.73%。(3)大叶黑桫椤快繁体系的构建:无机盐浓度对孢子萌发没有显著性影响,但1/10MS为相对较好的培养基,孢子萌发为40.66%;IBA、NAA、KT、6-BA这四种植物生长调节剂对诱导GGB都有一定的积极作用,0.3 mg/L的IBA是诱导产生GG B最优的配方,诱导率达52.00%,增殖倍数达4.44;0.3 mg/L NAA对GGB分化的促进作用最显著,分化率最高,可达45.33%;0.1 mg/L IAA+0.3 mg/L NAA的组合可有效促进孢子体幼苗生根,生根率达52.00%。(4)不同因素对二形卷柏孢子萌发的影响:酒精消毒20 s,再用7%Na Cl O离心5min的消毒方式最优,孢子的污染率只有13.33%,萌发率也较高,为13.33%;将大孢子做破壁处理之后,大、小孢子混合接种于培养基中才能实现孢子萌发,萌发率为20.00%,萌发时间为49天;蔗糖浓度和盐浓度对孢子萌发没有显著影响,无论是何种处理孢子的萌发率都很低,其中20 g/L蔗糖+MS是较好的培养基,孢子萌发率达16.00%。通过配子体诱导GGB途径,两种桫椤属植物从孢子萌发到幼苗移栽的整个培养过程为6-8个月。这不仅提高了繁殖系数,也大大缩短了桫椤属植物的繁殖时间,为实现桫椤属植物的工厂化育苗奠定基础。本文尝试通过配子体诱导GGB途径繁育卷柏属植物,但是由于二形卷柏的孢子萌发时间长,而且萌发率很低,所以本文无法进行后续的培养实验。日后可考虑采用茎尖、叶等作为外殖体,构建卷柏属的快繁殖体系。
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