根结线虫核糖体DNA序列分析和药剂对根结线虫生物活性研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:l_zhijie1234
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本文对北京、山东、江苏、安徽、四川、河北、海南和浙江等地不同植物上的25个根结线虫种群进行了rDNA-ITS-PCR扩增分析,并对这些PCR产物进行回收测序。结果表明,北京密云的豇豆、番茄、苦瓜,北京植保站月季,山东胶州,烟台和潍坊的花生,安徽和县的番茄,宿州的黄瓜和太和的桔梗,北京畜牧所沙打旺以及中国农业大学两个番茄品种(RKN-23和RKN-25)上的根结线虫种群的PCR扩增片段长度为768bp;江苏赣榆苦瓜,云南昆明,河北廊坊,安徽宿州和四川成都番茄以及安徽泅县黄瓜上根结线虫种群的PCR扩增片段长度为769bp;海南安定木瓜和石榴上根结线虫种群的PCR扩增长片段度为772bp;中国农业大学另外两个番茄(RKN22和RKN-24)品种上的根结线虫种群的PCR扩增片段长度为766bp;而浙江杭州黄瓜和海南安定胡椒上的根结线虫种群的PCR扩增长度分别为767bp和869bp。根据25个根结线虫种群序列比对分析和聚类分析可知,河北廊坊的番茄根结线虫、安徽宿州的黄瓜和番茄根结线虫、安徽太和的桔梗根结线虫、安徽和县的番茄根结线虫、浙江杭州的黄瓜根结线虫、四川成都的番茄根结线虫、安徽泗县的黄瓜根结线虫和中国农业大学四个不同番茄品种上的根结线虫的序列之间同源性为100%;它们与花生根结线虫(M.arenaria)和南方根结线虫(M.incognita)的遗传距离最近,序列同源性分别达到100%和99%。因此,这12个根结线虫种群属于花生根结线虫(M.arenaria)或是南方根结线虫(M.incognita)。北京密云的豇豆和番茄根结线虫、山东烟台,胶州和潍坊的花生根结线虫、江苏赣榆的苦瓜根结线虫、云南昆明的番茄根结线虫、以及北京畜牧所的沙打旺根结线虫之间的序列同源性为100%,它们与北方根结线虫(M.hapla)和爪哇根结线虫(M.javanica)的的遗传距离最近,序列同源性达到100%,而海南安定的木瓜和石榴根结线虫之间的同源性为100%,它们与北方根结线虫(M.hapla)和爪哇根结线虫(M.javanica)的遗传距离也非常接近,序列同源性达到99%;北京植保站提供的月季根结线虫和北京密云的苦瓜根结线虫之间的序列同源性为100%,它们与北方根结线虫(M.hapla)和爪哇根结线虫(M.javanica)的的遗传距离也很近,序列同源性达到98%。这12个根结线虫种群属于北方根结线虫(M.hapla)或是爪哇根结线虫(M.javanica)。海南安定的胡椒根结线虫ITS序列与番禺根结线虫(M.panyuensis)的遗传距离最近,同源性达到97%,这个胡椒根结线虫种群属于番禺根结线虫(M.panyuensis)。根结线虫对世界上重要的经济作物每年造成的损失高达数百亿美元,因此对根结线虫进行药剂防治研究具有非常重要的现实意义。从14个单剂和两个单剂三个比例的复配对根结线虫的室内毒力测定结果可以看出,阿维菌素(EC)和印楝素(EC)对南方根结线虫作用5小时后的LC50分别为20.888μg/mL和37.942μg/mL;噻唑磷和丙溴磷在药后24小时对南方根结线虫LC50值分别为13.4236μg/mL和6.2538μg/mL;相对于其他单剂,这些药剂对根结线虫的生物活性更高,可以作为大田根结线虫防治的主要推荐药剂。四硫钠,天然绿保4号,1.6%阿维菌素·苦微乳剂,甲胺基阿维菌素苯甲酸盐和绿土地1号等单剂虽然生物活性低于以上几种单剂,但是由于其对环境的友好性,则可根据特定的情况选择性的推荐使用,在实际的生产和管理中也具有一定的参考价值。至于博落回,NC1,NC2和NC3等四种单剂,由于其对根结线虫的毒力较低(LC50>400μg/mL),不适宜用于根结线虫的防治。阿维菌素和噻唑磷两两复配增效作用非常明显,三种配比(2:3、3:2和1:20)在药后24小时对南方根结线虫LC50值分别为0.6790μg/mL、0.6032μg/mL、0.9953μg/mL;该复配通过进一步研究可以成为根结线虫防治的主要防治药剂。
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