北疆地区马铃薯黄矮病的初步研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:danielliang
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马铃薯是新疆重要的经济作物之一,在生产中马铃薯植株出现黄化矮化现象,严重影响了产量。为了了解马铃薯黄矮病发生及危害情况,于2006—2007年对新疆天山以北乌鲁木齐,沙湾,奇台,玛纳斯,克拉玛依,奎屯,阿勒泰,伊犁,塔城等主要马铃薯种植区的马铃薯黄矮病进行了调查,典型症状为:植株极端矮化并伴有顶端丛生,由新叶向老叶黄化,病薯块茎小而轻,出现龟裂,表面凹凸不平。其发病率为22%—80%,病情指数为0.19—27.56。另外,调查显示北疆马铃薯黄矮病的发生率与栽培措施有一定的关系。从北疆奇台2号田间马铃薯黄矮病株中,获得了病毒分离物PV-1,经过RT-PCR扩增,证实病毒分离物PV-1是马铃薯卷叶病毒。用双链RNA的提取方法从北疆乌鲁木齐西山农场,伊犁,阿勒泰的田间马铃薯黄矮病样提取病毒双连RNA,从伊犁10号田间病样接种后三次单斑分离的昆诺阿藜中获得分离物PV-2,经过生物学鉴定和RT-PCR扩增,证实病毒分离物PV-2是马铃薯纺锤茎块类病毒。从奇台7号田间马铃薯黄矮病样三次单斑分离的黄花烟中获得分离物PV-3,经过生物学鉴定疑是马铃薯黄矮病毒,有待进一步证实。对病毒分离物PV-1和PV-2的相关基因进行了克隆和序列分析,以提取的RNA为模板,应用RT-PCR扩增,PCR产物克隆到质粒PMD20-T上并序列分析。结果表明,克隆病毒分离物PV-1基因的片段由639个核苷酸组成,编码212个氨基酸。与国内外已报道的19个PLRV CP基因序列进行比较,核苷酸同源性高达95.03%-98.80%,氨基酸同源性高达97.12%-100%。该分离物PV-1鉴定为马铃薯卷叶病毒。克隆病毒分离物PV-2相关基因片断是包含363bp基因是包含RNA相关基因的一部分。所测得的PSTVd分离物PV-2与世界各国已报道的部分PSTVd基因序列比较,核苷酸同源性高达92.2%-99.8%。该分离物PV-2鉴定为马铃薯纺锤茎块类病毒。北疆马铃薯黄矮病毒病毒原种类通过多重RT-PCR田间检测,结果表明:北疆马铃薯种植区检测的700株病样中,以PVY为优势病毒种类,占32.28%,其次是PVX,PVS,PSTVd,PLRV,PVA次之,分别占18.92%,17.07%,15.03%,8.53%,8.16%,复合侵染病毒占23%。
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