巩膜上静脉烙闭法建立大鼠慢性高眼压青光眼模型

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目的通过巩膜上静脉烙闭法(episcleral veins cauterization,EVC)建立大鼠慢性高眼压青光眼模型,观察其对大鼠视网膜结构的影响,为青光眼视神经损伤及保护机制提供研究基础;观察线粒体靶向抗氧化肽SS31对大鼠慢性高眼压青光眼模型视网膜的影响,为寻求青光眼视神经保护新方法提供实验依据。方法1)随机选取SD大鼠40只,术前3天测量基线眼压,以右眼作为实验眼,烙闭其3条巩膜上静脉,左眼作为对照眼,于术后即刻、1-7天、14天、21天、28天测量眼压。于术前及术后28天行OCT测量视网膜神经节细胞复合体(ganglion cell complex,GCC)及全层视网膜厚度。于术后28天处死大鼠,行石蜡包埋、HE染色切片,计数视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs),测量视网膜厚度。2)随机选取SD大鼠60只,随机平均分为4组,分别为:正常对照(NC)组:未作处理;EVC组:右眼行EVC;EVC+SS31组:双眼行EVC,21天后,右眼行玻璃体腔注射SS31,左眼行玻璃体腔注射生理盐水;SS31组:不行EVC手术,仅在21天时行玻璃体腔注射。术前3天测量基线眼压,于术后6h、1-7天、14天、21天、28天分别测量各组眼压,于术前及术后28天行OCT测量GCC及全层视网膜厚度。于术后28天处死大鼠,行石蜡包埋、HE染色切片,计数RGCs,测量视网膜厚度。结果1)术前左右眼压差异无统计学意义(P>0.05),实验眼EVC术后即刻、1-7天、14天、21天眼压均较对照眼高(P<0.001),术后28天实验眼与对照眼眼压对比差异无统计学意义(P>0.05)。OCT结果显示:实验眼术后GCC厚度较术前变薄(P<0.001),术后实验眼GCC厚度较对照眼薄(P<0.001)。HE染色切片结果显示:实验视网膜内、中、外层、GCC厚度均较对照眼薄(P<0.05),其中以内层视网膜变化最明显,减少率达32.16%。实验眼RGCs数量较对照眼显著减少(P<0.001)。2)术前各组间眼压差异无统计学意义(P>0.05),EVC术后6h、1-7天、14天、术后21天眼压升高(P<0.001),术后28天眼压降至正常(P>0.05)。OCT结果显示:EVC组术后GCC厚度较术前变薄,术后EVC组GCC厚度较NC组薄,EVC+SS31组GCC厚度较EVC组厚(均有P<0.001)。HE染色切片结果显示:EVC组视网膜内、中、外层、GCC厚度均较NC组薄,EVC+SS31组视网膜GCC及内层厚度较EVC组厚(均有P<0.05)。EVC组RGCs数量较NC组显著减少,EVC+SS31组RGCs数量较EVC组多(P<0.05)。结论1)巩膜上静脉烙闭法可引起大鼠术后眼压升高维持21天,且能使RGCs减少、视网膜变薄,尤其是内层视网膜,是建立大鼠慢性高眼压青光眼模型有效的方法;2)初步得出线粒体靶向抗氧化肽SS31对大鼠慢性高眼压青光眼模型的视网膜及RGCs具有保护作用。
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